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LG胶囊中灵芝多糖的含量测定的论文.doc
LG胶囊中灵芝多糖的含量测定的论文
【摘要】 目的 建立保健食品lg胶囊中灵芝多糖含量测定的方法。方法 以葡萄糖为对照品,采用蒽酮-硫酸比色法,在625nm处测定lg胶囊中灵芝多糖的含量。结果 葡萄糖浓度在0.01002~0.06012mg/ml之间有良好的线性关系(r=0.9996),平均回收率为97.06%,rsd=1.81%。结论 该方法简便、快速、准确,可用于lg胶囊的质量控制。
【关键词】 lg胶囊;灵芝多糖;蒽酮-硫酸比色法
lg胶囊是由灵芝多糖及多种营养成分配伍制成的一种保健食品。灵芝多糖有广泛的药理活性,能提高机体免疫力,提高机体耐缺氧能力,消除自由基,抑制肿瘤,抗辐射,提高肝脏、骨髓、血液合成dna、rna、蛋白质能力,延长寿命,灵芝多糖还具有刺激宿主非特异性抗性、免疫特异反应以及抑制移植肿瘤生理活性的特性。在处方中,灵芝多糖用量较大,而且在发挥处方疗效中起主要作用。因此,选择灵芝多糖作为指标性成分对此保健食品进行质量控制。目前比色法为灵芝多糖的常用分析方法,主要有蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法[1,2]。本研究采用蒽酮-硫酸比色法对lg胶囊中灵芝多糖的含量进行了测定。
1 材料
752型紫外-可见分光光度计,shimadzu ay220型电子天平(准确到0.1mg),sartotius bp211d型电子天平(准确到0.01mg)。.cOmd-无水葡萄糖对照品(购自中国药品生物制品检定所,供含量测定用,批号10833-200302)。试剂均为分析纯。lg胶囊(自制,批号分别20100119。
2 方法与结果
2.1 供试品溶液的制备
取本品内容物粉末约0.1g,精密称定,置索氏提取器中,加水50ml,电加热器加热回流提取至提取液无色,提取液转移至100ml量瓶中,用少量水洗涤容器,洗涤液并入量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密量取10ml,加入乙醇150ml,摇匀,4℃放置12h,取出,离心,倾去上清液,沉淀加水溶解并转移至50ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取105℃干燥至恒重的d-无水葡萄糖对照品适量,加水制成毎1ml中含0.1mg的溶液,摇匀,即得。
2.3 显色剂的制备
精密称取蒽酮0.1g,加80%的硫酸溶液100ml使溶解,摇匀,即得。
2.4 测定方法
分别精密吸取对照品溶液1ml 与供试品溶液2ml,置10ml具塞试管中,加水至2.0ml,精密加入显色剂硫酸蒽酮溶液6ml,摇匀,置水浴中加热15min,取出,放入冰浴中冷却15min,以相应的试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(2005年版中国药典一部附录va),在625nm波长处测定吸收度。
2.5 方法学考察
2.5.1 标准曲线
分别精密吸取对照品溶液0.2ml,0.4ml, 0.6ml, 0.8ml, 1.0ml, 1.2ml,置10ml具塞试管中,照“2.4”项下方法操作,在625nm波长处测定吸收度。以吸收度为纵坐标,浓度(mg/ml)为横坐标,绘制标准曲线。得到回归方程为:y=9.3641x+0.0943(r=0.9996),线性范围为0.01002~0.06012mg/ml。
2.5.2 精密度试验
取浓度为0.04008mg/ml的葡萄糖对照品溶液,照“2.4”项下方法操作,连续测定6次,rsd为0.21%。结果表明该方法精密度良好。
2.5.3 重复性试验
取批号本品内容物粉末,照“2.1”项下的方法依法制得供试品溶液6份,照“2.4”项下方法操作。结果6份样品中灵芝多糖的平均含量为91.00mg/g,rsd为2.82%。
2.5.4 稳定性试验
取“2.5.4”项下第一份溶液,照“2.4”项下方法操作,间隔若干时间测定1次,2 h内的rsd为0.40%。结果表明显色后溶液在2h内稳定??
2.5.5 加样回收率试验
取批号本品内容物粉末6份,毎份约0.05g,精密称定,分别精密加入葡萄糖对照品5mg,照“2.1”项下的方法依法制得供试品溶液6份,照“2.4”项下方法操作。结果平均回收率为97.06%,rsd为1.81%。结果见表1。表1 加样回收试验结果 表2 多糖含量测定结果
2.5.6 含量测定
取批号本品内容物粉末,照“2.1”项下的方法依法制得供试品溶液6份,照“2.4”项下方法操作。结果见表2。
3 讨论
本标准的制订主要参考《中国药典》(2005版一部)灵芝项下多糖含量测定方法,根据本产品中多糖的含量,调整供试品取样量为0.1g。
本方法中蒽酮的配制要求为80
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