MMP2和VEGF在骨软骨瘤、骨巨细胞瘤和骨肉瘤组织中的表达及临床意义的论文.docVIP

　　MMP2和VEGF在骨软骨瘤、骨巨细胞瘤和骨肉瘤组织中的表达及临床意义的论文 【摘要】 目的 探讨基质金属蛋白酶2(mmp2)及血管内皮生长因子(vegf)在软骨瘤、骨巨细胞瘤和骨肉瘤组织中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化法检测mmp2和vegf在骨软骨瘤、骨巨细胞瘤和骨肉瘤组织各20例中的表达，并分析其与年龄、性别和复发、转移等因素的关系。结果 vegf和mmp2在骨巨细胞瘤和骨肉瘤组的阳性表达率(60%，70%;90%,80%)明显高于软骨瘤组(25%,30%)(plt;0.05，plt;0.01)，且两者的表达有显著正相关性(plt;0.05)。mmp2和vegf的阳性表达与复发和转移显著相关(plt;0.05，plt;0.01)，与年龄和性别无关。结论 mmp2和vegf可作为骨巨细胞瘤和骨肉瘤的预后指标。 【关键词】 基质金属蛋白酶2;血管内皮生长因子;骨软骨瘤;骨巨细胞瘤;骨肉瘤 近年的研究表明〔1，2〕，基质金属蛋白酶(mmp)和血管内皮??长因子(vegf)与恶性肿瘤的侵袭及转移关系密切。已有报道vegf和mmp2在骨肿瘤中存在高表达，而且与转移和复发关系密切〔3，4〕，但尚未见联合检测mmp2和vegf在骨软骨瘤、骨巨细胞瘤和骨肉瘤组织中的表达及临床意义的报道。本实验拟采用免疫组化法，联合检测vegf和mmp2在软骨瘤、骨巨细胞瘤和骨肉瘤组织中的表达，并分析其与年龄、性别和复发、转移之间的关系，比较两者之间的差异及相关性。. 　　1 材料与方法 　　1.1 临床资料 骨软骨瘤、骨巨细胞瘤和骨肉瘤各20例患者均为2003年7月至2008年7月辽宁医学院附属第一医院骨科住院病人，术前均未行放疗和化疗，术后标本经病理证实诊断，术后常规治疗并定期复查，随访12～60个月，平均36个月。骨巨细胞瘤患者20例，男5例，女15例，年龄14～57岁，平均(27.85±11.09)岁;发病部位：股骨8例，胫骨4例，桡骨4例，腓骨3例，骶骨1例;术后复发8例，转移9例。骨肉瘤患者20例，男14例，女6例，年龄8～56岁，平均(24.15±13.39)岁;发病部位：股骨8例，胫骨8例，肱骨4例;术后复发16例，转移17例。软骨瘤患者20例，男8例，女12例，年龄4～62岁，平均(26.65±15.63)岁;发病部位：股骨8例，胫骨6例，肱骨2例，肋骨2例，肩胛骨1例，踝骨1例，术后无复发及转移。 　　1.2 免疫组织化学染色(sabc法) 术后组织立即用中性福尔马林固定，自动脱水，浸蜡，包埋。石蜡标本连续切片4张，4 μm 厚，1张he染色，1张pbs代替一抗阴性对照。antimmp2和antivegf兔抗人多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗购自santa cruz公司，sabc组化试剂盒购自武汉博士德公司。按照试剂盒说明操作。 　　1.3 结果判断 光学显微镜下观察蛋白表达情况，照相。阳性结果为细胞胞浆或胞膜棕黄着色，随机选取5个高倍镜视野，计数方法采用hpias1000高清晰度彩色病理图文分析系统,按阳性细胞所占比例分为(-)：瘤细胞染色阴性或lt; 5% 的瘤细胞有少量着色;(+):5%～20%的瘤细胞呈弱阳性;()：21%～50% 的瘤细胞阳性;():gt;50%的瘤细胞阳性且着色较强。计数由病理科两位资深医生操作。 　　1.4 统计学分析 采用spss12.0统计软件，r×c表χ2检验及四格表χ2检验。mmp2、vegf的相关性比较采用linear correlation相关分析。 　　2 结 果 　　2.1 vegf与mmp2的免疫组化结果 vegf阳性产物呈棕褐色颗粒，主要定位于肿瘤细胞浆，部分血管内皮细胞质及细胞外基质也有弱阳性表达(图1)。vegf在骨巨细胞瘤组和骨肉瘤组的阳性表达明显高于软骨瘤组(plt;0.05，plt;0.01);vegf在骨肉瘤组的阳性表达亦高于骨巨细胞瘤组(plt;0.05)(见表1)。mmp2阳性产物主要位于肿瘤细胞浆内及胞膜,呈棕黄色颗粒(图2);mmp2在骨巨细胞瘤组和骨肉瘤组的阳性表达亦明显高于骨软骨瘤组(plt;0.05，plt;0.01);mmp2在骨肉瘤组的阳性表达虽高于骨巨细胞瘤组，但无统计学差异(pgt;0.05)。表1 vegf和mmp2在不同组织中的表达 　　2.2 不同组织中vegf和mmp2表达的相关性 见表2。vegf和mmp2共同阳性表达在软骨瘤组中4例，骨巨细胞瘤组中13例，骨肉瘤组中16例，经线性相关分析，软骨瘤组、骨巨细胞瘤组和骨肉瘤组vegf和mmp2表达存在显著正相关(plt;0.01)。 　　2.3 不同组织中vegf和mmp2的表达与临床资料的关系 见表3。骨巨细胞瘤组中vegf