四磺基锰酞菁作为过氧化物模拟酶在过氧化氢测定中的应用.pdfVIP

第 31 卷 分析化学（FENXI HUAXUE） 来稿摘登 第 6 期 2003 年 6 月 ChiIese JourIal of AIalytiOal Chemistry 768 四磺基锰酞菁作为过氧化物模拟酶 在过氧化氢测定中的应用 李永新 赵丹华 卓淑娟 朱昌青! 王 伦 （安徽师范大学化学与材料科学学院，芜湖 241000） 1 引 言 过氧化氢的测定在医学和环境科学中都具有很重要的意义。目前已有许多测定过氧化氢的方法，如光度法、荧光 法、电分析法及化学发光法等。四磺基锰酞菁（MITSPO）是一种与金属卟啉有着类似母体结构的金属酞菁类化合物，它具有 过氧化物模拟酶的性质。继前文用对羟基苯乙酸和 !-酪氨酸两种经典荧光底物成功实现对过氧化氢进行荧光分析测定 后，我们又发现，用邻苯二胺（OPD）做底物，以 MITSPO 催化其与过氧化氢反应，也可实现对过氧化氢的高灵敏测定。本文研 究了此催化荧光反应的最佳条件，建立了测定过氧化氢的催化荧光分析新方法，并成功实现了对环境水样的分析测定。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 F-4500 型荧光光度计（日本日立公司）；MITSPO 由厦门大学化学系合成并纯化，配成 0. 001 mol/L 的水 溶液为储备液；邻苯二胺（OPD，中国上海五联化工厂）：1. 0 X 10 - 3 mol/L，密封冷藏保存（能放置一个星期）；过氧化氢由 溶液稀释成 水溶液，并用 标定其准确浓度。所用试剂均为 级，水为亚沸高纯水。 30% 0.3% KMIO4 A. R. 2.2 实验方法 在 15 mL 具塞刻度管中依次加入 pH 7. 6 Tris-HCl 缓冲溶液 1. 5 mL，0. 01 mol/L OPD 溶液 1. 5 mL，1. 0 X - 5 溶液 ，最后加入一定浓度的 系列标准溶液及样品溶液，用二次亚沸水定容至刻度线，混合 10 mol/L MITSPO 3.0 mL H2 O2 均匀后，在室温下反应 30 miI，测定溶液在激发波长 432 Im、发射波长为 560 Im 处的荧光强度。 3 结果与讨论 3.1 反应产物的光谱特性 邻苯二胺是一非荧光物质，在 pH 7. 6 Tris-HCl 缓冲溶液介质中，当有 MITSPO 存在下，它可 以被过氧化氢迅速氧化为 2，3-二氨基吩嗪。其在上述实验条件下能发射出较强的荧光，激发波长和发射波长分别为 432 度的增加，荧光强度也相应增强。当 MITSPO 浓度在 1. 5 X 10 - 6 ~ 4. 0 X 10 - 6 mol/L 时，体系的荧光强度达到最大且较稳 定。故本文采用 3.0 mL 1.0 X 10 - 5 mol/L 的 MITSPO 做为实验浓度。 3.5 底物浓度的选择 研究结果表明，随着 OPD 浓度的增加，体系荧光及背景荧光强度都相应增加。当 O