高效液相色谱法测定动物组织样品中黄曲霉毒素的残留量.pdfVIP

第 33 卷 分析化学（FENXI HUAXUE） 研究简报 第 6 期 2005 年 6 月 C1inese JOurnaI Of AnaIyticaI C1emistry 850 ~ 852 高效液相色谱法测定动物组织样品中黄曲霉毒素的残留量 史莹华＊ 许梓荣 冯建蕾 李家胜 （浙江大学饲料科学研究所，杭州 310029） 摘 要 采用免疫亲合技术，对动物肝脏和肌肉中黄曲霉毒素残留进行了提取和纯化处理，建立了一种快速、 灵敏、简便的测定动物组织中黄曲霉毒素 、 、 、 的高效液相色谱方法。用反相 分离，柱后光化 B1 B2 G1 G2 HPLC 学衍生，荧光检测器测定黄曲霉毒素含量，保留时间定性，峰面积定量，测定了样品和标准样。结果表明，4 种 毒素可在 10 min 内完成分离；线性范围为 15 ~ 1500 pg；线性回归系数大于 0. 9998。用本方法对动物肝脏和 肌肉样品进行了加标回收实验，4 种黄曲霉毒素的平均回收率为 68. 71% ~ 83. 42% ；相对标准偏差为 3. 51% ~ 7. 40% ；检出限均达到 2. 65 pg。 关键词 高效液相色谱，黄曲霉毒素，免疫亲合，光化学衍生 ! 引 言 黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物，现已知饲料、食品或培养基中的黄曲霉毒素有 、 B1 、 、 、 、 、 、 等 多种，这类毒素因含有大环共轭体系，热稳定性非常好，分解温度高达 B2 G1 G2 M1 M2 B2! G2! 10 ［1］。黄曲霉毒素具有极强的毒性和致癌性，可引发动物的肝癌、肾癌、胃癌等。其中 的毒性是 280C B1 ［ ］ 氰化钾的 10 倍，砒霜的 68 倍，被确认为类致癌物 2 。据统计，我国霉菌毒素污染率达 90% ，其中严 重污染而达到禁用程度的达 15% ~ 25% ，在气候温湿的广大南方地区尤为严重，造成了巨大的经济损 失。更为严重的是，残留在动物产品中的黄曲霉毒素可以通过食物链导致人类的肝癌［3］。 自从 1960 年发现黄曲霉毒素以来，世界各国纷纷制定了食品、饲料及牛奶中黄曲霉毒素的卫生限 量标准［4］。 年欧盟规定食品中的黄曲霉毒素总量不得超过 ， 不得超过 ［5］。目 1999 4 #g / kg B1 2 #g / kg 前用液相色谱法测定食品、饲料和牛奶中的黄曲霉毒素已比较普遍［6 ~ 8］。对于组织样品中黄曲霉毒素 的测定尚未见报道，本实验利用免疫亲和柱净化结合高效液相色谱法测定了组织样品中的黄曲霉毒素， 取得了满意的效果。 # 实验部分 #. ! 仪器