胃癌组织TSER多态性与5Fu体外药敏的论文.docVIP

　　胃癌组织TSER多态性与5Fu体外药敏的论文 【摘要】 目的探讨胃癌组织胸苷酸合成酶增强子区(tser)多态性与5fu体外药敏的关系。方法对45例胃癌患者新鲜标本进行体外肿瘤细胞原代培养，用atptca法检测肿瘤细胞对5fu的敏感性并用pcr法检测肿瘤的tser多态性，分析tser多态性分布频率与体外药敏有效率的关系。结果tser多态性三种基因型频率分布： 2r／2r、2r／3r、3r／3r基因组分别为6.7%(3/45)、31.1%(14/45)和62.2%(28/45)。5fu总有效率为33.3%(14/42)。3r／3r基因组26例,有效5例,无效21例,有效率19.2%；（2r／2r、2r／3r）基因组16例，有效 9例，无效7例,有效率56.3%。tser基因型组之间对5fu敏感性存在显著差异性（plt;0.05）。结论tser多态性对5fu化疗敏感性可能有关,基因型检测可能有助于预测胃癌组织对5fu化疗敏感性。 【关键词】 胃癌;胸苷酸合成酶增强子区多态性; 5氟尿嘧啶;体外药敏试验 correlation betorphism and sensitivity of gastric cancer tissue to 5fluorouracil he edical department ,graduate school of nanchang university corresponding author:deng jinyun,email: jxshidylate synthase enhancer region (tser) polymorphism and the antitumor activities of 5fluorouracil (5fu) determined by atp sensitivity assay in vitro.methodsthe carcinoma cells isolated from fresh gastric tissue in 45 patients ethod. tser genotypes osensitivity to 5fu orphism of tser or activities of 5fluorouracil, indicating that analysis of tser polymorphisms might be useful to direct 5fluorourcilbased antitumor chemotherapy. key idylate synthase enhancer region (tser) polymorphism; 5fluorouracil; chemosensitivity assay in vitro 1资料和方法 1．1临床资料收集2005年9月~2007年11月期间外科手术的胃癌患者新鲜标本45例，所有患者均在术后病理证实为胃癌。.所有患者术前均未接受过化、放疗。其中男29例,女16例。患者年龄35~71岁，平均年龄51岁。浸润深度，pt1为4例、 pt2为13例、pt3和pt4分别为23例和5例。有淋巴结转移33例，无淋巴结转移12例。 1．2标本处理 新鲜标本分为两份,一份装入含有100u/ml的青霉素、100μg/ml链霉素的rpmi1640的离心管中，立即送于atptca法体外药物敏感性检测;另一份放入液氮中，转置-80℃冻存以备pcr法检测其ts基因多态性。 1．3atptca法体外药敏试验和pcr法检测其ts基因型 1．3．1atptca法体外药敏试验atptca核心试剂盒（德国dcs），购自深圳达科为生物技术公司；胶原酶ⅳ、透明质酸酶ⅴ、dna酶ⅰ、ficollhypaque均购自上海试剂二厂；rpmi1640干粉购自gibco公司。按照试剂盒使用说明书操作进行。配制8000％血浆峰浓度（peak plasma concentration,ppc）的化疗药物，100％ppc 5fu：22.5μg/ml(试剂盒说明书附录)；配制细胞解离酶。制备癌细胞悬液：无菌条件下清洗癌组织，清除脂肪,纤维组织,血块及坏死组织，将癌组织充分剪成小碎块，然后加入解离酶液，37℃孵育6h，将细胞解离液通过300目的钢网过虑，1500r/min，离心5min×2，用rpmi1640重悬制备成单细胞悬液。ficollhypaque梯度分离。肿瘤细胞原代培养癌细胞悬液用完全分析培养基稀释，调整细胞浓度至2.5×105个/ml；以每孔0.1ml接种至96孔培养板内。按400%、200%、100%、50%、25%和12.5%的血浆峰值浓度，将药物加入培养孔