双波长薄层扫描法测定冬凌草片中总黄酮的含量.docVIP

　　双波长薄层扫描法测定冬凌草片中总黄酮的含量 【摘要】 　　目的 采用双波长薄层扫描法测定冬凌草片中总黄酮的含量。方法采用日本岛津CS-9301双波长飞点薄层扫描仪，硅胶GF254薄层板，展开剂：醋酸乙酯甲酸水（8∶1∶1），激发波长269 nm。结果片剂中其它成分对测定无干扰。总黄酮的点样量（X）在1～6 μg范围内与峰面积（Y）线性良好，Y=133.3X+80.416，r=0.999 2，n=5,平均回收率是98.67%，RSD=1.50%,实验的精密度、稳定性、重现性都很好。结论该法操作简便，精密度好，结果准确可靠。 【关键词】 双波长薄层扫描法； 总黄酮； 含量测定 　　Abstract:ObjectiveTo determine the total flavonoid in Rabdosia rubescens Tablets by TLCS.MethodsThe shimadzu CS-9301 TLC scanner ic acid.ResultsThe determination of the total flavonoid ent ethod is rapid,accurate and reliable. 　　Key ination 　　冬凌草为唇形科香茶菜属植物，又名冰凌草，以地上部分入药。广泛分布于黄河流域及其以南广大地区，主产于河南太行山区。味甘苦，性微寒，具清热解毒、消炎止痛、健胃活血及抗肿瘤之功效［1］。本实验采用双波长薄层扫描法，以芦丁为对照品，对冬凌草片中总黄酮进行了含量测定。 　　1 仪器与材料 　　1.1 仪器 　　日本岛津CS-9301双波长飞点薄层扫描仪，KQ-100A型超声波清洗器，10 cm×20 cm硅胶板GF254（上海信谊仪器厂），双槽层析缸。 　　1.2 材料 　　冬凌草（河南济源市济世药业有限公司提供，0.25 g/片，批号2005072420060680，芦丁对照品（ 中国 药品生物制品检定所），其它试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品25 mg,置25 ml容量瓶中，以80%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。 　　2.2 供试品溶液的制备 　　取冬凌草片4片，研细，精密称重约1.581 6 g平均片重约（0.394 5 g），用80%乙醇超声提取2次，30 min/次，过滤，合并两次滤液，置100 ml容量瓶中，加80%乙醇定容至100 ml，摇匀，作为供试品溶液。 　　2.3 扫描条件的确定 　　双波长反射法锯齿扫描：λs=269 nm，λR=221 nm，SX=3。 　　2.4 线性关系的考察 　　用1 μl定量毛细管吸取芦丁对照品溶液各1，2，3，4，5，6 μl点于硅胶GF254薄板上，以醋酸乙酯-甲酸-水（8∶1∶1）为展开剂展开，展距约12 cm，取出晾干，扫描。以峰面积为纵坐标，以对照品点样量为横坐标，绘制标准曲线，测得回归方程为：Y=133.3X+80.416, r=0.999 2。结果表明，冬凌草在1～6 μg范围内点样量与峰面积线性关系良好。 　　2.5 稳定性实验 　　吸取对照品溶液及供试品溶液各6 μl点于同一硅胶GF254薄板上，按上述条件每隔30 min重复扫描测定，持续2 h。结果积分值保持不变，性质比较稳定。 　　2.6 精密度实验 　　吸取对照品溶液6.0 μl点于同一硅胶GF254薄板上，共5点，依法展开，扫描。结果表明，RSD=1.47%（n=5）［2］。 　　2.7 回收率实验 　　取已知含量的冬凌草样品提取液5 ml ,加入5 mg芦丁对照品，混匀后制成回收液。取回收液2.0 μl，对照品溶液1.0 μl和3.0 μl点在同一块硅胶上，以同法测定，外标二点法定量， 计算 回收率。结果见表1。表1 回收率实验测定结果（略） 　　2.8 样品的含量测定 　　取冬凌草样品溶液6 μl，按上述方法依次测定5批样品含量。结果见表2。表2 样品含量测定结果（略） 　　3 结论 用双波长薄层扫描法测定冬凌草片中总黄酮的含量，平均回收率达98.67%，RSD为1.50%，且该方法简便，不受辅料等其它成分的影响，准确性高，重现性好，值得推广。 【 参考