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吡格列酮对游离脂肪酸作用下βTC3细胞GPR40表达的干预作用
【摘要】 目的 探讨游离脂肪酸(FFA)作用下胰岛βTC3细胞G蛋白受体40(GPR40)mRNA表达的改变以及吡格列酮(Piog)对此改变的干预作用。 方法 以βTC3细胞为研究对象,分为对照组及FFA组(0.25,0.5及1 mmol/L)。半定量RTPCR方法检测GPR40的表达。用不同浓度的Piog(0,0.1,1,10 μmol/L)预孵育βTC3细胞6 h,加入1 mmol/L FFA继续孵育24 h,半定量RTPCR方法检测GPR40的表达。 结果 (1)FFA孵育12 h后,各组间GPR40的表达差别无统计学意义。(2)FFA孵育24 h后,与对照组比较,0.25 mmol/L FFA组GPR40的表达无差异,但0.5 mmol/L和1 mmol/L FFA组GPR40表达下调(Plt;0.05);0.5 mmol/L与1 mmol/L FFA组比较GPR40表达差别无统计学意义。(3)与1 mmol/L FFA组比较,0.1 μmol/L Piog+1 mmol/L FFA组GPR40 mRNA表达无差异,而1 μmol/L Piog +1 mmol/L FFA组和10 μmol/L+1 mmol/L FFA组GPR40表达升高(Plt;0.01)。 结论 长期高浓度FFA作用能够下调βTC3细胞GPR40的表达,而Piog有助于保护或减轻FFA水平异常导致的βTC3细胞GPR40表达的损害。
【关键词】 噻唑烷二酮类; PPARγ; 脂肪酸类; 糖尿病,2型; 受体,G蛋白偶联
of GPR40 in βTC3 cells induced by free fatty acids(FFA) and the intervention effect of pioglitazone(Piog) on those expressions. Methods βTC3 cells studied in the experiment ents mol/L). Semiquantitative RTPCR analysis ine the RNA expression level of GPR40 in βTC3 cells after 12 hours and 24 hours respectively. Afterol/L)for 6 hours, and 1 mmol/L FFA ined by semiquantitative RTPCR at last. Results (1) After the cells ong all the groups. (2) After the 24hour incubation, no difference mol/L FFA and the control group. But pared to the control group and the group mol/L FFA, the expression of GPR40 in βTC3 cells in both groups mol/L FFA and that mol/L FFA decreased after the 24hour incubation (Plt;0.05). There mol/L FFA and that mol/L FFA. (3)Though no statistically significant difference ol/L Piog+1.0 mmol/L FFA and that mol/L FFA, the RNA expression level of GPR40 in both the group ol/L Piog+1.0 mmol/L FFA and that ol/L Piog+1.0 mmol/L FFA increased pared to the group mol/L FFA (Plt;0.01). Conclusion The expression of GPR40 in βTC3 cells may be inhibited by longterm administration of FFA of high concentration, pairment in βTC3 cell.
KEY EM培养基(美国GIBCO公司),油酸和棕榈酸均(美国Sigma公司),Piog(恒瑞集团江苏德源药业有限公司)。
1.2 方法
1.2.1 FFA溶液的制备
FFA贮备液中油酸与棕榈酸的比例为2∶1。溶解所需剂量的油酸和棕榈酸于
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