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离子选择性电极法测定离子钙.doc
离子选择性电极法测定离子钙
【关键词】 离子选择性电极法
[关键词] 离子选择性电极法;测定;离子钙
Measurement Ion Calcium ent; Ion Calcium
钙是体内生存离不开的元素,离子钙是生理活性钙,它比总钙更能反映出体内钙的代谢状态。钙的正常值范围小,更需要掌握其特点,创造良好的实验条件,用离子选择性电极法(ISE)测定钙优点较多,比EDTA滴定法精确度大,我们用ISE法测钙收到满意效果。
1 资料与 方法
1.1 资料 来源门诊病例52例,其中有小儿惊厥(1/12岁~10/12岁)6例,晚期孕妇(22岁~37岁)15例,关节疼痛、四肢活动受限的老年人(58岁~70岁)11例共32例为症状组,正常体检20例为正常组。
1.2 仪器
1.2.1 仪器 AFT500D电解质系列 分析 仪:深圳康立 科学 仪器有限公司提供。
1.2.2 试剂 EDTA滴定法测钙试剂盒:北京北化精细化学品有限责任公司提供。
1.3 方法
1.3.1 抽早晨空腹静脉血时,分别注入二支干燥试管内,一支定为一组,另一支定为二组。
1.3.2 一组测定
1.3.2.1 抽血后立即分离血清,同时用ISE法和EDTA滴定法;二种方向各测其钙值。
1.3.2.2 用ISE法测定离子钙
按仪器要求进行开机、活化、标定,待通过后进行血清吸样、测定,这一系列全由微机控制,电脑打印出结果。下面列表五项分别观察。
1.3.2.3 用EDTA滴定法测总钙
取0.1 ml血清于15 mm×150 mm试管内;另设标准管加标准液0.1 ml;各加0.2 mol/L的NaOH溶液1 ml;各加钙红指示剂2滴;滴加EDTA Na2溶液,边加边摇动试管,直至管内淡红色液变为淡兰色为终点,记录各管EDTA Na2用量; 计算 :测定管EDTANa2用量(ml) 标准管EDTANa2用量(ml)×2.5=mmol/L。
1.3.3 二组测定
1.3.3.1 抽血后标本放置3 h后离出血请进行测定。
1.3.3.2 按一组的二种 方法 测定其离子钙和总钙。
2 结果
见表1~表5。表1到表4可以看出各组各方法测定的结果正常组与症状组比较均有明显差别(Plt;0.01)。表1 一组ISE浊测离子钙结果比较(略)注:Plt;0.01差别有显著意义。表2 一组EDTA滴定法测总钙结果比较表(略)注:P<0.01差别有显著意义。表3 二组ISE浊测离子钙结果比较(略)注:Plt;0.01差别有显著意义表4 二组EDTA滴定法测总钙结果比较(略)注:Plt;0.01差别有显著意义表5 ISE法一组与二组值比较(略)注:正常组Pgt;0.05差别无显著意义。症状组Plt;0.01差别有显著意义。
从表5看出,用ISE法测定离子钙,正常组的一组与二组差别不大(Pgt;0.05),而症状组就有显著的差别(Plt;0.01)。
一组测定,ISE法,正常组CV是4.65%,症状组CV是5.59%;EDTA滴定法测定正常组CV是5.56%;症状组CV是6.79%,由此看来,ISE法精密度高于EDTA滴定法,二组测定基本相似。
3 讨论
经过统计处理,从表1到表4中可以看出各组各方法测定的结果,正常组与症状组比较均有显著的差别Plt;0.01,即低钙可以引起各种临床症状,说明钙在人体生存中占有重要地位。
因为离子钙比总钙更能反映出体内钙代谢的状态。ISE法测的就是离子钙,本法选择性变,标本用量少,操作简便,程序由微机控制,优点较多。从一组测定结果来看,正常组CV:4.65%,症状组CV:5.59%,EDTA滴定法正常组CV:5.56%症状组CV:6.79%,说明ISE法精密度变于EDTA滴定法。
EDTA滴定法测的是人体的总钙,本法测定时钙红指示剂在碱性溶液中不稳定,终点不易观察,测定管和标准管变色有时不太一致,终点不好掌握,测定时必须了解,掌握其特点后加以改进以达到检验要求。
血液离体后CO2会很快丢失,使pH值升高,导致结合钙增加,离子钙测定偏低,经过统计学处理,从表5看出,标本放置3 h后再离心测定(即二组测定),钙值偏低,症状组Plt;0.01,所以在采血后要尽快分离出血清进行测定(1 h之内),这样才能使效果满意。
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