基质金属蛋白酶9和血管内皮生长因子在膀胱移行上皮细胞癌中的表达及其临床意义.docVIP

　　基质金属蛋白酶9和血管内皮生长因子在膀胱移行上皮细胞癌中的表达及其临床意义 作者：侯国军，金铁雄，吴文元，李晓刚，朴敏虎，朴东明 【关键词】 膀胱癌；基质金属蛋白酶；血管内皮生长因子；免疫组织化学 膀胱肿瘤是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，其中膀胱移行上皮细胞癌占90%以上，其生物学特性是多中心、易复发及浸润性生长。复发后肿瘤恶性度可增高，浸润、转移等行为有增强趋势。此过程与肿瘤细胞外基质的降解、新生血管的大量形成有密切关系。本文结合46例膀胱移行上皮细胞癌的病理分级和临床分期，探讨了基质金属蛋白酶(matrix metalloprotEinases, MMPs)和血管内皮生长因子(vascular endothelial groa, BTCC)中的表达及其临床意义。 1 资料与 方法 1.1 研究 对象 收集延边大学 医院 2000-2005年间原发性BTCC住院手术患者标本46例。所有标本均经病理检查证实。其中男30例，女16例，年龄36-78岁，平均60.91岁。所有患者术前均未行药物化疗、放射 治疗 、免疫或生物治疗。获得随访5年的46例中，复发21例，存活37例。按分期采用UICC标准：浅表性16例(Tis-T1)，浸润性30例(T2-T4)。另取10例正常膀胱黏膜作为对照。全部标本经4%(体积分数)中性甲醛溶液固定，石蜡包埋、切片，并行HE和免疫组织化学染色。 1.2 实验方法 采用SP免疫组化法。具体操作按通用型SP9706试剂盒说明书进行。一抗分别为鼠抗人MMP9多克隆抗体和鼠抗人VEGF多克隆抗体。每次实验均设阳性及阴性对照，MMP9和VEGF阳性对照为已知胃癌的免疫组化染色阳性片，阴性对照为PBS液替代一抗。 1.3 结果判定标准 高倍显微镜(×400)下观察5个视野，每个视野计数100个细胞，以阳性细胞百分率和染色强度为判定标准[12]。胞质无染色为阴性(-)；阳性细胞数lt;20%为弱阳性(+)；阳性细胞数20%-60%为中度阳性()；阳性细胞数gt;60%为强阳性()。 1.4 统计学处理 应用 SPSS 11.0统计软件采用χ2检验及相关性 分析 ，Plt;0.05为差异有统计学意义。Kappa值＝1表示一致，Kappa值＝0表示不一致。 2 结 果 2.1 MMP9和VEGF表达阳性率 MMP9和VEGF的阳性染色主要位于癌细胞胞浆内，呈弥散性分布，部分间质细胞也有表达(图1)。两种蛋白在正常膀胱移行上皮细胞中均不表达或低表达，而在BTCC中阳性表达率分别为76.1%和67.4%，两组差异有统计学意义(Plt;0.01)。 2.2 MMP9和VEGF表达与病理分级、临床分期的关系 MMP9和VEGF分别在BTCC的病理分级和临床分期中表达的差异均有统计学意义(Plt;0.05，表1)。 2.3 MMP9与VEGF表达之间的关系 在BTCC组织 MMP9阳性表达组中，VEGF的阳性表达率为80.0%；MMP9阴性表达组中，VEGF的阳性表达率为27.3%，两种蛋白的表达水平呈正相关关系(Plt;0.01，表2)。表2 膀胱癌组织中MMP9和VEGF的表达采用χ2检验，χ2= 0.480，Kappa值=0.469 3 讨 论 有关 研究 表明，MMP9在BTCC中较正常膀胱上皮高表达且随分级增高,表明随肿瘤恶性程度的增加MMP9的表达有升高趋势[3]。另外，OBrien等[4]对45例BTCC和8例正常膀胱组织进行VEGF检测，BTCC中的表达高于正常膀胱组织3倍之多，说明VEGF是BTCC的恶性表型之一。本文中两种蛋白联合检测结果显示，MMP9、VEGF在正常膀胱移行上皮细胞中不表达或低表达而在BTCC中高表达；其次，两种蛋白阳性表达水平在BTCC的病理分级、临床分期中也表现出随着浸润深度的增加而增高，这与