复方阿胶浆对体外培养人肺癌PG细胞的凋亡作用实验.docVIP

　　复方阿胶浆对体外培养人肺癌PG细胞的凋亡作用实验 作者：刘培民， 田守生， 尤金花， 解锡军， 解福生 【关键词】 复方 　　摘要：目的探讨含复方阿胶浆鼠血清对肺癌PG细胞周期和凋亡率作用 影响 。 方法 采用血清药 理学 方法，开展了复方阿胶浆含药血清对肺癌高转移株PG细胞体外培养，通过流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率(APO)的变化。结果复方阿胶浆含药血清可显著提高肺癌细胞凋亡比率，中、高剂量组与对照组相比有非常显著性差异(P＜0.01)，阻滞细胞分裂停止于G0期，各剂量组与空白组相比有非常显著性差异(P＜0.01)。结论复方阿胶浆含药血清可显著诱导肺癌细胞凋亡，阻滞细胞分裂中止，因而具有抗肺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用，可改善肺癌等实体瘤患者的预后。 　　关键词：复方阿胶浆；血清药理；肺癌；诱导凋亡 　　复方阿胶浆是东阿阿胶股份有限公司出品，为国家中药保护品种，药物组成为阿胶、党参、红参、熟地、山楂等。方剂取材于明代医家张景岳“两仪膏”，具补气养血之效，临床主要用于 治疗 气血两虚证，如贫血、白细胞减少及免疫力低下等，临床疗效显著。东阿阿胶股份有限公司作为全国阿胶生产厂家的龙头 企业 ，近几年联合国内知名院校开展了“阿胶二次开发”的科研攻关，力求用 现代 的医学 理论 和技术来阐述并开发阿胶及其复方的治疗作用、 应用 范围。我们开展了复方阿胶浆对肺癌高转移株PG细胞诱导分化和凋亡的药理实验。现将结果报告如下。 　　1 实验器材 　　1.1 药物复方阿胶浆(山东东阿阿胶股份有限公司，批号2004081602)。 　　1.2 动物I 1640培养液(含10％小牛血清，青、链霉素各100 u／m1)8 ml，置于37℃、饱和湿度含5％CO2的CO2细胞培养箱中无菌培养。细胞呈贴壁生长，每2～3 d传代。 　　2.3 分组分4组，正常大鼠对照组(空白组)，复方阿胶浆低剂量(5％)含药血清组，复方阿胶浆中剂量(10％)含药血清组，复方阿胶浆高剂量(15％)含药血清组。 　　2.4 实验 方法 与操作取对数生长期的肺癌PG细胞，经消化、离心，计数，以2×105／ml的量接种于小培养瓶中，37℃ 5% CO2含10％新生牛血清的RPMI l640培养基中培养48 h，至细胞生长旺盛后，去掉上清液，分别加入以上各组不同浓度的含药大鼠血清培养细胞，于培养箱中继续培养48 h，然后收集细胞，分别离心，用PBS液洗涤3次，将细胞沉淀充分打散、混匀，70％冷乙醇4℃固定24 h以上。上机前离心去除乙醇固定液，PBS清洗1次，离心，倒掉PBS后，使管内剩余约5 ml PBS，指肚轻轻敲打，使细胞悬浮，加入20 μl lmg／ml的RNase酶，37℃水浴反应30 min，各管加入1 ml的0.5 μg/ml碘化丙锭(PI)溶液，避光染色30～45 min，400目网过滤后上机检测。流式细胞仪(FACScan)计数104个细胞，激发波长488 nm， 分析 不同DNA含量的细胞分布，Mac软件进行数据处理，低于G1期的细胞为凋亡细胞，其占细胞总数的比例为凋亡细胞比例［2］。共分4组，每组4瓶。记录打印出结果并统计。 　　3 结果 　　见表1，从表1中可以看出：阿胶可以诱导肺癌PG高转移株细胞凋亡率增高，使细胞周期阻滞在G0G1期的比例增多，与空白组相比有显著性差异。表1 含药血清培养后的细胞周期及凋亡率变化（略） 　　4 结论 　　复方阿胶浆由阿胶、熟地、红参、党参等组成，功效补气养血，主治气血两虚证，临床用于贫血和白细胞减少症等，疗效显著。在癌症放化疗期间合用复方阿胶浆可明显改善副作用，提高生存质量延长病人的生存期［3］。为此我们开展了复方阿胶浆辅助放化疗 治疗 癌症的实验 研究 ，动物实验证实：复方阿胶浆对S180肉瘤、Le.