外界条件的改变对红花离体培养的影响.docVIP

　　外界条件的改变对红花离体培养的影响 作者：杨晶，李天航 熊立东，付宏歧 李校堃 【摘要】 目的研究外界培养条件的变化对红花离体培养过程中不同发育阶段培养物的影响。方法以红花种子诱导的无菌苗子叶为外植体，分别接种至含有不同碳氮源、不同PH值、不同温度、不同湿度和不同光照的培养基中，观察其生长情况。结果通过实验筛选出蔗糖浓度为3%，KNO3浓度为MS培养基中KNO3浓度的2倍，最佳pH为6.2，红花离体培养体系在24℃，30%的相对湿度，16 h光照，8 h黑暗交替培养的条件下，最利于红花的分化。结论3%的蔗糖作为碳源，最适合愈伤组织的生长;2倍于MS培养基中的KNO3含量有利于愈伤组织的生长和不定芽的分化;pH值为6.2时，最适宜红花不同阶段培养物的生长;24℃为红花离体培养的最适温度，生根时的温度为21℃较好;湿度为50%时，适于愈伤组织鲜重积累，30%的湿度适于不定芽分化和生根;黑暗培养利于鲜重积累，16 h光照，8 h黑暗交替培养有利于不定芽的分化，8 h光照，16 h黑暗交替培养有利于生根。 【关键词】 红花愈伤组织; 不定芽; 蔗糖 ; 氮源; pH值; 温度; 湿度; 光照 　　Abstract：ObjectiveTo study the effect of changed outside culture conditions on the saffloent stages of culture in vitro. MethodsThe saffloedium peratures, humidity and light and its groes MS medium KNO3 concentration the optimal pH of 6.2 at 24 ℃, 30% relative humidity, 16 h light, 8 h dark cycle under the conditions of culture, the most beneficial to the floost suitable for callus groes KNO3 content in MS medium in favor of the callus groum temperature, take root perature of 21 ℃ for the better; humidity of 50%, suitable for callus accumulation of fresh idity suitable for differentiation of adventitious buds and root; dark culture conducive to the accumulation of fresh perature; Humidity; Illumination 　　红花为菊科一年或二年生双子叶草本植物，喜温暖、干燥气候，抗寒性强，耐盐碱。红花全身是宝，花、籽粒、茎叶、秸秆等均可综合利用，是一种集药材、油料、染料为一体的特种 经济 作物[1]。由于红花无性快繁体系很难建立，并且目前国内对红花离体培养的研究很少，因此本文通过改变不同的培养条件来研究红花无性快繁体系的建立，以期有利于红花的资源保护、扩大繁殖和进一步推广应用。 　　 1 材料与方法 　　1.1 材料红花种子由新疆塔城种子公司提供; 实验以采收后1年后的红花种子不同日龄无菌苗子叶作为外植体。 　　1.2 方法红花种子，经70%酒精清洗30 s， 0.1 %升汞表面灭菌10 min, 无菌水洗4～5次，接种到种子萌发培养基: 1/2MS+1.5%蔗糖+1 mg·L-1GA中，取接种7日龄的红花无菌苗子叶作为外植体, 分别接种至含有不同碳氮源、不同pH值、不同温度、不同湿度和不同光照的愈伤组织诱导培养基和中;培养一段时间后，测定愈伤组织的鲜重增长量。 　　子叶完全愈伤化以后，将其转入不同pH值的分化培养基中，诱导不定芽的产生。设置不同的温度梯度和不同光照强度的条件，培养25 d后，观察不定芽的形成情况，观察分化情况，待不定芽形成以后，将其移至生根培养基中，每20 d继代1次，观察生根情况。 　 　2 结果 　　2.1 碳源在红花愈伤组织生长过程中的作用碳源既是重要的能源物质，也是一种重要的渗透压调节物质，对植物离体形态发生起着非常重要的作用。而碳源的主要提供形式是糖类物质，其中以蔗糖最为普遍，蔗糖是植物体内糖类运输的主要形式，也是某些植物贮藏的主要化合物。有研究认为，蔗糖的浓度对于组织培养很重要，适当的浓度对于维持培养基渗透势，提高植物组培再生频率具有重要意义。因此，本实验探讨了不同的蔗糖浓度在红花脱分化过程中起的作用，分别