生化分离重点.docVIP

1膨胀床吸附: 兼有固定床和流化床的优点。 2膨胀床分离技术: 不同形式的吸附技术，同种技术的不同状态：固定床/膨胀床/流化床 3膨胀床装置与传统柱吸附装置的重要区别在于底部有个液体分布器，上端有个床层调节器，用于调节床层高度 4萃取技术: 双水相萃取、反胶团萃取、凝胶萃取、固相（微）萃取、超临界萃取 5这种含有聚合物分子的溶液发生分相的现象称为聚合物的不相容性 6双水相萃取：两相为互不相溶的两水相，而目标组分因为在两相中溶解度不同而分离 7成相是由于聚合物间不相容。 8两水相体系的影响因素：两相组成、高分子聚合物分子量、浓度、极性、 两相溶液比例、盐类、溶质的物理化学性质、体系的温度、pH值 9双水相的优势：不会引起生物活性物质失活或变性、可以直接从培养液中提取所需的组分、 界面张力小(10-7～10-4mN／m)，有助于两相之间的质量传递、不存在有机溶剂残留问题、 大量杂质可与固体物质一同除去、易于工艺放大和连续操作、操作条件温和 10双水相的问题：含水量高，后续分离需经浓缩、含高分子聚合物或盐类，分离后需进一步分离纯化以除去、高聚物成本较高，回收困难、高聚物粘度高，易乳化 11双水相萃取的应用：细胞器及生物大分子，生物小分子的分离、核酸和细胞碎片的去除 12反胶束：反胶束(reversed micelle)是表面活性剂分散于连续有机相中一种自发形成的聚集体。 13表面活性剂是反胶束溶液形成的关键。反胶束溶液是透明的、热力学稳定的系统。 14反胶束形成后。在反胶束中，表面活性剂的非极性基团在外与非极性的有机溶剂接触，而极性基团则朝内围成一个极性核。形成了一个“水池”。 15蛋白质溶入反胶束溶液的推动力主要包括表面活性剂与蛋白质的静电作用力和疏水作用。 16反胶团萃取的方法：相转移法、溶解法、注入法 17反胶束体系的分类：单一表面活性剂反胶束体系、混合表面活性剂反胶束体系、亲和反胶束体系 18影响反胶束萃取的因素：表面活性剂的浓度、种类 、表面溶剂的种类、助表面活性剂及其浓度、pH值、离子的浓度、强度 、蛋白质的等电点、大小、浓度、蛋白质表面的电荷分布、系统的温度、压力 19反胶束萃取的优势：成本低、溶剂可反复使用、萃取率和反萃取率都很高、表面活性剂往往具有溶解细胞的能力，因此可用于直接从整细胞中提取蛋白质和酶、保护蛋白质免受有机相的影响 20反胶束技术的应用：蛋白质，氨基酸，抗生素等生物分子的分离、用于蛋白质的复性、 直接提取细胞内产物、同时提取脂类和蛋白质 21凝胶：在水中不溶解的亲水性交联聚合物 22亲水性有机凝胶的两大特性：涨缩特性和相变特性 23凝胶萃取：利用凝胶的涨缩特性，在聚合物凝胶吸水膨胀时，带入小分子和无机盐进入凝胶，而大分子无法进入，可以实现大分子的浓缩纯化。利用凝胶的相变特性，在凝胶收缩时，把吸收的物质和水分排出，可以使凝胶复性重复使用。 24凝胶萃取的基本步骤： 1.凝胶对溶剂和小分子的吸收 2.膨胀凝胶的分离回收 3. 在适当条件下，使凝胶释放所吸收的物质，重复再生。 25萃取的凝胶类型：温度敏感型、pH敏感型、电敏感型凝胶 26凝胶萃取的影响因素：合成水量、离子度的影响、凝胶颗粒的大小分布的影响、凝胶交联度的影响 27超临界流体（supercritical fluid,简称SCF或者SC）：是指高过物质本身的临界温度和临界压力状态时的流体 28超临界流体兼有液体和气体的双重特性：粘度接近气体、密度接近液体 29超临界萃取结合了溶剂萃取和蒸馏两种功能和特点。 30而流体密度对于超临界流体的溶解能力有决定性的影响，密度增加，溶解度上升；密度减小，溶解度下降，甚至消失， 31超临界萃取的特点：超临界萃取的特点、萃取彻底、溶剂回收简单无残留，无三废产生 、条件温和、萃取剂的溶解能力易于通过调节温度和压力控制。、节省能源 32对于超临界流体的要求：1、具有良好的溶解性能。2、具备良好的选择性。3、化学性质稳定，无毒，无腐蚀性，不易燃易爆4、操作温度应接近常温，以节约能源，并不会导致目标物质热变性分解。5、操作压力应尽可能低6、来源广泛，价格低廉 33提高超临界流体选择性的两个原则：体系的操作温度与超临界流体的临界温度接近。、超临界流体的化学性质与待萃取成分的化学性质相似。 34二氧化碳临界温度31.2临界压力72.9P临界密度0.433 35CO2超临界流体溶剂的主要特点：CO2的临界温度接近常温、惰性气体，化学性质稳定、 属于非极性溶剂、价廉易得，工艺简单，效率高，能耗低，使用安全、极强的均一化作用 36一些功能良好的极性溶剂难以工业化，如氟利昂，N2O。这种情况下，可以通过添加极性不同的夹带剂来调节超临界二氧化碳的极性， 37夹带剂的问题：1. 残留问题，由于使用了夹带剂，就丧