冬凌草超临界二氧化碳萃取物体外抑菌作用研究.docVIP

　　冬凌草超临界二氧化碳萃取物体外抑菌作用研究 作者：礼彤，阎韵， 翟增伟， 范立敏， 周丽莉 【摘要】 目的考察冬凌草对细菌生长的抑制作用，并比较超临界提取产物与乙醇回流提取物的抑制效果。方法超临界二氧化碳萃取冬凌草，管碟法证明萃取产物的抑菌能力，并用二倍稀释法测定敏感菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果冬凌草提取物在金黄色葡萄球菌、藤黄八叠球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、产气杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌生长平板上有很明显的抑菌圈，超临界提取物的最小抑菌浓度为（mg/ml）金黄色葡萄球菌0.031 75，藤黄八叠球菌0.015 875，枯草芽孢杆菌0.031 75，大肠杆菌0.125，产气杆菌0.125，绿脓杆菌0.062 5，变形杆菌0.062 5。结论冬凌草提取物对大多数的细菌生长有抑制作用，而且超临界提取物抑制效果明显优于乙醇回流提取物。 【关键词】 冬凌草； 超临界二氧化碳萃取； 抑菌作用； 管碟法； 二倍稀释法； 最小抑菌浓度 　　Antimicrobial Test of Extracts from Rabdosia rubescens 　　Abstract:ObjectiveTo evaluate the bacteriostasis of extracts from Rabdosia rubescens. MethodsThe cylinder-plate method proving the bacteriostasis of extracts from Rabdosia rubescens, ethod ining minimal inhibitory concentration of sensitive bacteria. ResultsThe extracts of Rabdosia rubescens had certain inhibition zone on medium. The minimal inhibitory concentration of supercritical CO2 extracts onas aeruginosa,0.062 5; Bacillus proteus,0.062 5 mg/ml.ConclusionThe extracts from Rabdosia rubescens are efective on most bacteria. The supercritical fluid extracts are better than the alcohol refluxing extracts. 　　Key ethod; Double broth dilution method; Minimal inhibitory concentr atio 冬凌草Rabdosia rubescens (Hemsl.) Hara又名冰凌草，为唇形科香茶菜属多年生草本植物［1］。其中的冬凌草甲素是迄今为止研究最多，疗效最为明确的贝壳杉烯二萜类化合物［2］。药 理学 实验证明冬凌草甲素具有明显的抗癌、降压、抗菌、抗氧化等作用［3～5］。临床主要应用于 治疗 急性咽炎，扁桃体炎［6］等。近年来，超临界二氧化碳萃取技术由于其萃取能力强、萃取条件温和、绿色环保等优点，广泛应用于中药的提取分离［7］。本实验中冬凌草提取物由超临界二氧化碳提取法和传统的乙醇回流法获得。 迄今为止，关于冬凌草的研究主要集中在抗癌、抗肿瘤药理作用以及提取工艺等方面，对其抗菌作用的相关报道较少。因此本文对不同提取工艺冬凌草提取物的抗菌范围进行了考察，并对其抗菌活性进行比较。 　 　1 材料 实验菌种(沈阳药科大学微生物教研室提供：金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus CMCC26001；枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis SYCDC63501；绿脓杆菌 Pseudomonas aeruginosa SYCDC10104；藤黄八叠球菌 Sarcina lutea ATCC28001；大肠杆菌 Escherichia coli ATCC25923；产气杆菌 Enterobacter aerogenes；变形杆菌 Bacillus proteus；克氏杆菌 Bacillus kerclmeri。 　 　2 方法 　　2.1 不同提取工艺将河南省济源市药材供应站提供的冬凌草全草，叶和茎大致分开，取叶多茎少的部分粉碎，干燥至恒重，作为原料备用。 　　2.1.1 乙醇提取工艺取干燥至恒重的冬凌草粗粉100 g,加400 ml 95%乙醇回流提取2次，2 h/次,先减压过滤滤去残渣，再常压过滤滤去絮状物，减压蒸馏回收溶剂后，真空干燥产物至恒重。经分析，所得浸膏中甲素含量为4.13