植物营养研究法6章其它研究法.pptVIP

三．植物营养诊断的程度 （一）诊断的目的： 1．缺何种元素 2．是否存在潜在缺乏 3．缺素原因：土壤、吸收 4．确定某种作物缺某元素的临界值 5．拟定合理施肥方案 （二）步骤 1．观察： 指标：生长速度、株型长相、色泽等 排除无营养元素以外的其它原因，如病虫害、药害、连作障碍、异常天气（旱、涝、温、冷、盐、光） * 2．调查 （1）症状类型及特点：色泽、斑点、形状、长相、地下部、老叶、新叶 （2）环境条件：土壤：类型、地形、母质、质地、水分条件 天气：阴雨、干旱 （3）发病经过：向栽培管理人员询问症状发生经过，何时发病、最初症状、发展变化。 （4）栽培管理过程： 施肥：种类、数量、有机肥 前茬作物：施肥状况 * 3．现场速测：结合形态症状可以判断大多缺素类型 4．采样分析：如果前“3”不能肯定判断，则采样，包括植物、土壤、有病的与正常的。 5．校验：外形、化学诊断有时可能失误，进一步施肥诊断。 6．总结：完成以上各项工作后，着手整理资料，撰写总结，提出诊断结论及防治意见。 * 植物根养分离子吸收动力学研究方法 一．离子吸收动力学方程 1．吸收动力学：概念 2．最早的离子吸收动力学模拟方程 Epstein(1952),plant physiol,27:457-474 酶促反应动力学方程用于植物对离子吸收的研究 Michelis—Menten方程：I=Imax*C/(Km+C) Km:I=Max/2时介质离子浓度。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 第六章 植物营养的其它研究方法 * 第一节 植物营养的土壤酶学研究法 一．酶的概念及类型 酶：具有专性催化作用的蛋白质，活的生物体合成 类型——国际酶学委员会分类 1．氧化还原酶类 2．转移酶类 3．水解酶类 4．裂解酶类 5．异构酶类 6．连接酶类 * 二．土壤酶 （一）土壤酶的种类 目前已知的存在于生物体中的近2000种酶类中，约有50余处累积于土壤中。 研究最多的是：氧化还原酶类、水解酶类 研究较少的是：转移酶类、裂解酶类 不曾涉及的是：异构酶、连接酶 * （二）土壤酶来源 微生物产生的胞外酶 植物根系溢泌的酶 土壤动物溢泌的酶 （三）存在部位 胞外酶：土壤溶液、土壤固体、 土 壤有机体吸附 土壤胞内酶：微生物、根、动物中 * （四）土壤酶研究的应用 1．评价土壤肥力水平和供肥能力 土壤潜在肥力——酶活性）——植物有效养分三者关系密切。 土壤肥力主要物质基础——土壤有机质，是土壤酶底物的主要给源。 2．诊断植物营养元素丰缺 土壤缺P——磷酸酶活性高 土壤施P——磷酸酶活性低 * 3．鉴别土壤类型 1964年俄国科学家用脱氢酶鉴别钙质土，得出酶活性顺序为：黑钙土栗钙土棕钙土。 4．净化土壤、减轻危害：氰氨化钙形成氰酸铵的分解——氰基酶；农药残留物 控制脲酶，减少NO3、NO2积累。 5．调控土壤酶活性，提高肥料利用率：脲酶活性——尿素分解快则氨挥发，慢则尿素淋失。 * 三．土壤酶的研究方法 1．土样采集：代表性，根际内外酶活性不同 2．土样贮藏：一般认为：新鲜土样酶活性大于风干样；土样一经风干，再延长存放时间，酶活性失活较小；恒温贮藏（4度）或冻藏（-5度——-40度）酶活性失活较小，冷冻最好；田间湿度条件下贮藏样品，酶活性更能反映实际。 3．土样称量：一般1-5克，酶活低的10克。酶反应速度随土样称量呈现线性增加，过少测定不准确。 * （二）土壤样品微生物的纯化 　　使土壤酶活性与微生物活性区分开来。 理想方法是：有效抑制微生物增殖生长和生理过程，不破坏微生物的细胞，防止酶渗出，也不破坏土壤理化性质，常用以下两种途径： 1．化学灭菌剂：常用适当浓度的甲苯，其作用为抑制微生物增殖，导致某些微生物质壁分离或胞溶，也可能引起某些酶活性升高或降低。 　　甲苯的适当浓度，土样重的20%，土壤悬浮液体积的5-10% 其它灭菌剂：乙烯氧化物、苯、丙酮、醚、氯仿等。 2．高能电离辐射：X射线或r射线，使微生物失去增殖能力，土壤理化性质改变甚微，土壤酶活性影响较小，是一种较好的灭菌法，但需特殊设备，代价较高。 * （三）酶作用基质与酶促反应环境 1．基质：酶活性是用酶促基质转化的数量或产物的数量来表示 　种类：选择一种酶作用的底物，标准方法中每次测定选用同一底物，以便比较。 　加入基质以保证酶促反应期间基质转化速度保持恒定为准， 　即反应结束时基质有一定剩余，但不能太多 * 2．酶促反应环境：环境条件影响酶活性，为使测得酶活性最大，须使环境条件最适。 （1）各种酶要求的pH条件不同，选择适宜pH缓冲体系。 （2）温度：目前一般采用