什么是原代培养和-萧山三中.ppt

* * 外植体 愈伤组织 胚状体 植物体 植物组织培养的过程 脱分化 再分化 1.阅读教材p27-29 ①如何从动物组织获得单个细胞？ ②动物细胞，在人工控制的环境下培养，可能表现出哪些生命活动？ ③不同动物细胞，在进行培养时，表现生命活动的能力有无差异？应该选择哪些细胞作为动物细胞培养的材料？ 动物细胞的生长特性 （1）贴壁生长： 悬浮液中分散的细胞紧贴培养瓶内壁才能生长。 （2）接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂。 （3）正常的生命活动： 生长、分裂、有规律的衰老、死亡等现象，但不分化。 细胞贴壁过程 细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止。 接触抑制 动物细胞在人工控制的环境中，可以生存，并保持生长分裂等生命活动，那么，如何进行动物细胞培养？ 2.阅读教材p28--30 ①采用什么培养方法培养动物细胞？ ②与植物组织培养比较，动物细胞培养基有何要求？ ③观察图2-6，请描述动物细胞培养过程？ 动物细胞培养过程 从动物胚胎或幼龄动物组织切片中取小片样品 转入特殊培养液原代培养 分装到多个卡氏瓶中传代培养 细胞悬浮液 细胞系 机械消化或胰蛋白酶酶解 培养过程 原代培养物 选择或纯化 选择或纯化 细胞株 细胞株 阅读教材，回答： 什么是原代培养和传代培养？ 细胞悬浮液 转入特殊培养液 换瓶后培养 原代培养 传代培养 思考： 1.为什么要传代培养？ 2.采用什么方法转移细胞，分装到培养瓶进行传代培养？ 原代培养 传 代 培 养 ………… 原代培养物 细胞系：可连续传代的细胞 原代培养物在首次传代时就成为细胞系。 能连续培养的 连续细胞系 不能连续培养的 有限细胞系 细胞系 （二倍体细胞） （异倍体核型细胞） （1）恶性细胞系，异体致瘤性 （2）保留接触抑制，不致癌 细胞株： 通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞系。 如：单抗细胞株 细胞株一般具有恒定的染色体组型、同工酶类型、病毒敏感性和生化特性等。 连续细胞株：可连续多次传代的细胞株。 有限细胞株：传代次数有限的细胞株 细胞系：泛指可传代的细胞。 细胞株: 具有特殊性质的细胞系。 克隆培养法（细胞克隆） 1、概念： 把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术。 2、特点： 遗传性状均一、表现的性状相似 3、最基本要求: 保证所建成的克隆来源于单个细胞 动物细胞全能性的表现程度 桑椹胚 八分 裂球 受精卵 二分 裂球 四分 裂球 囊胚 原肠胚 幼体 组织、器官 1、动物的受精卵，卵裂球含有2-8个细胞时，每个细胞具有全能性。 2、随着胚胎发育的继续，有的细胞只具有分化出各种组织细胞的潜能，这样的细胞叫多能干细胞。 3、有的细胞只能分化为一种细胞，叫单能干细胞。 1、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （　 ）　　 A、容易产生各种变异 B、具有更强的全能性 　 C、取材十分方便 　　 D、分裂增殖的能力强 D 2、用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A．都需用CO2培养箱 B．都须用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行 D．都可体现细胞的全能性 C 3、某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法正确的是 (　　) A.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理 B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞的呼吸 C.甲、乙细胞在持续的原代培养过程中，乙会出现停止增殖的现象 D.仅用该培养液也能用来培养乙肝病毒 C 世界上第一只克隆绵羊“多莉”的培育等程序如图所示。请仔细看图后回答问题： b ⑴图中 ａ过程为　 　。通过ａ过程形成 的重组细胞核遗传物质与质遗传物质各来自哪里？ ⑵b过程细胞分裂的方式是 ，此过程是否进行细胞分化？ （答“有”或“无”） （3）若不考虑环境因素影响，多莉的性状是否全部像以上绵羊？为什么？ 黑面绵羊去 核卵细胞 白面绵羊卵 腺细胞核 重组细胞 早期胚胎 另一头母绵羊子宫 克隆绵羊多莉 a b c d 细胞核