小青龙汤复方提取工艺比较研究.docVIP

　　小青龙汤复方提取工艺比较研究 作者：赖庆宽，尹蓉莉，杨宗锟，李世娟，廖芳，李颖 【摘要】 　　目的探讨提取方法、提取溶剂对小青龙汤复方提取的影响，并筛选出最佳提取工艺。方法拟用回流、渗漉两种传统提取法，水、60%乙醇、95%乙醇3种提取溶剂进行正交实验，以提取液中盐酸麻黄碱、芍药苷含量（权重系数依次为0.6，0.4）为指标，通过指标加权 计算 综合评分以评价提取工艺，筛选出6种不同提取工艺的最佳提取条件，再对这6种提取工艺进行相同方法不同溶剂、相同溶剂不同方法的比较研究。结果小青龙汤最佳提取工艺为以12倍量60%乙醇回流提取2次，1.5 h/次。结论所得优化提取工艺合理可行，可作为小青龙汤的提取工艺。 【关键词】 小青龙汤复方；正交实验；盐酸麻黄碱；芍药苷 　　Abstract：ObjectiveTo optimize the extraction method of Xiaoqinglong Tang.MethodsThe refluxing-extraction method and percoaltion-extraction method ethod ined six extraction methods.At last, the different solvents and methods ethod ethod that es amount of 60% Ethanol and refluxing -extracting for 1.5h(totally extracting for 2 times).ConclusionThe best extraction method is stable and reliable. 　　Key g于100 ml容量瓶中，以甲醇定容，摇匀，精密吸取2 ml于25 ml量瓶中，甲醇定容，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液备用。 　　麻黄供试品的制备：精密量取复方提取液适量（相当于麻黄生药0.2 g）于已干燥的锥形瓶中，低温挥干，以25 ml甲醇溶解，称定重量，超声处理45 min，放冷，再称定重量，以甲醇补足减少量，摇匀，滤过，精密量取续液1 ml，置中性氧化铝柱（100～200目，内径1 cm，1.5 g）上，以50%甲醇洗脱，收集洗脱液约9 ml于量瓶中，加磷酸1滴，以50%甲醇定容摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液备用。 　　测定方法：C18柱（250 mm×4.6 mm Diamonsil 5μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸（9∶90），以三乙胺调节pH=4.5，检测波长207 nm，流速1 ml/min，柱温25℃，理论板数以盐酸麻黄碱峰计，不得低于3 000。 　　盐酸麻黄碱标准曲线的绘制：分别吸取盐酸麻黄碱对照品溶液2，4，6，8，10，12，16，20，24 μl进样，按照测定方法测定，绘制标准曲线。结果见图1。回归曲线Y=1 722.7X+39.103，R2=0.999 8，盐酸麻黄碱进样量在0.017 288～0.207 456 μg间具有良好的线性关系。 　　2.1.2 芍药苷含量测定方法 芍药苷对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品适量，加入量瓶中，甲醇定容，制成60 μg/ml的甲醇对照品溶液，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液备用。 　　白芍供试品溶液的制备：精密量取复方提取液适量（相当于白芍生药0.1 g），水浴挥干，以35 ml稀乙醇转移至50 ml量瓶中，超声处理30 min，冷却至室温，稀乙醇定容，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液备用。 　　测定方法：C18柱（250 mm×4.6 mm,Diamonsil 5 μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸（14∶86），检测波长230 nm，流速1 ml/min，柱温25℃，理论板数以芍药苷峰计，不得低于2 000。 芍药苷标准曲线的绘制：分别吸取芍药苷对照品溶液1，2，3，4，6，8 μl进样，按照测定方法测定，绘制标准曲线，（见图2）。回归曲线Y=15 414X+2.539 1，R2=0.999 8，芍药苷进样量在0.006～0.048 μg间具有良好的线性关系。 　　2.2 6种提取工艺的优化研究及结果 　　2.2.1 不同提取溶剂回流提取工艺研究及结果以水、60%乙醇、95%乙醇为提取溶剂，按L9（34）正交表进行实验。因素水平安排按照表1执行，实验按各正交表实施，结果用SPSS11.5作方差分析，确定优化工艺。结果见表2～7。表1 不同溶液回流提取工艺因素水平（略）表2 以水为溶剂回流提取考察结果（略）表3 以水为溶剂回流提取方差分析结果（略）表4 以60%乙醇为溶剂回流提取考察结果（略）表5 以60%乙醇溶剂回流提取方差