平菇多糖提取工艺优化研究.docVIP

　　平菇多糖提取工艺优化研究 作者：吴宏华 王怡 钱磊 张春椿 陈微娜 【摘要】 ［目的］优化水提法提取平菇多糖的工艺，为平菇多糖的提取提供一种简单有效的方法。［方法］通过单因素试验和正交试验对水提法提取平菇多糖的工艺进行了研究，考察料液比、提取时间、提取温度三个因素对平菇多糖提取率的影响，并以正交试验设计优化工艺条件。［结果］平菇多糖的最佳提取工艺条件为料液比1∶35、提取时间3h、提取温度90℃。在此条件下得率可达2.84%。［结论］该方法简便、价廉、准确、灵敏度高，适合于平菇多糖的提取。 【关键词】 平菇多糖；正交试验；制药工艺 　　Abstract: ［Objective］ In order to optimize the best condition for the Pleurotus ostreatus. ［Methods］The single factor experiments e, temperature ents e is 3h. and the temperature is 90oC. Under these conditions the average yield of Polysaccharides is 2.84%. ［Conclusion］It is an ideal means for extracting Polysaccharides from Pleurotus ostreatus, e, less cost and sensitivity. 　　Key aceutical technique 平菇( Pleurotus ostreatus)又名白平菇、侧耳,属担子菌亚门,层菌纲,伞菌目,口磨科,是广泛栽培的食用菌之一［1］。中医研究认为平菇性味甘、温，具有追风散寒、舒筋活络的功效。常用于 治疗 腰腿疼痛、手足麻木、筋络不通等病症。长期食用平菇，可以降低血压、降低胆固醇含量、防止血管硬化，对更年期综合症有明显的调节作用，并对超氧阴离子自由基、羟基自由基均具有明显的清除作用［2］。目前对平菇多糖的生物活性已进行了相关研究,但对平菇多糖的分离提取还无系统的研究结果。因此，本文通过单因素试验和正交试验对水提法提取平菇多糖的工艺进行了研究，探索了水提法提取平菇多糖的最佳提取工艺条件，为平菇进一步的开发利用提供一定的 参考 依据。 　 　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　平菇为市售，经浙江中医药大学熊耀康教授鉴定确认为层菌纲伞菌目口磨科平菇(Pleurotus ostreatus)的子实体。葡萄糖、苯酚、硫酸、无水乙醇等均为分析纯，蒸馏水。 　　1.2 仪器 　　ZJ2020A型恒温干燥箱(浙江省诸暨市实验仪器厂)；万分之一 电子 分析天平（德国赛多利斯）；R201旋转蒸发仪（上海申胜生物技术有限公司）；电子恒温不锈钢水浴锅（上海中新医疗设备有限公司）；UV2600紫外分光光度计（上海优尼科）；大容量低速离心机（上海安亭 科学 仪器厂）。 　　1.3 方法 　　1.3.1 提取方法 　　平菇洗净烘干后适度粉碎，精密称取平菇3.0g，放入圆底烧瓶，设定料液比、提取时间、提取温度进行回流提取，提取液真空抽滤，取滤液，浓缩。滤液浓缩后加无水乙醇至醇沉浓度为80%，静置过夜，4000r/min离心5min，去除上清液，得沉淀即为平菇多糖。 　　1.3.2 含量测定方法 　　本实验采用苯酚硫酸法，以葡萄糖为标准品测定平菇多糖含量［3］。 　　1.3.2.1 对照品溶液的制备 　　准确称取干燥至恒重的葡萄糖粉末10mg于250ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照品溶液。 　　1.3.2.2 供试品溶液的制备 　　将1.3.1所得的多糖沉淀加水溶解，定容至100ml容量瓶中，摇匀，精密量取1ml，定容至25ml容量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。 　　1.3.2.3 最大吸收光波长的确定 　　吸取一定量的标准葡萄糖对照品溶液，置于比色管中，加水至2ml，加1ml 5%苯酚后，立即加入5ml浓硫酸并混匀， 静止10min，摇匀，室温放置20min同时取2ml水进行上述同样操作，作为空白对照。样品溶液分别于450～550nm处测吸光度，确定其最大吸收峰所对应的波长。根据实验测定，当吸收光波长为490nm时，样品溶液的吸光度最大，所以本实验选取吸收光波长为490nm。 　　1.3.2.4 标准曲线的绘制 　　分别精密吸取葡萄糖标准溶液0.05ml、0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0 ml于比色管中，各以水补至2.0 ml，然后加入5％苯酚1.0 ml及浓硫酸5.0ml混匀，静止10min，摇匀，室温放置20min后于490 nm测定吸光度，以2.0 ml水