盐酸托莫西汀胶囊在健康人体的药动学研究.docVIP

　　盐酸托莫西汀胶囊在健康人体的药动学研究 作者：饶斯清，陈楚雄，杨梦心，温预关 【摘要】 目的 建立快速、灵敏的托莫西汀人体内血药浓度的高效液相色谱串联质谱测定法，并对12名健康志愿者口服盐酸托莫西汀胶囊后在人体内的药动学过程进行研究。方法 12名健康志愿者单剂量口服给药20 mg后，分别于给药前和给药后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、5、6、8、10、12、24 h采集血样。用高效液相色谱串联质谱法测定血浆中托莫西汀的浓度，并采用DAS药动学程序对试验数据进行处理，求算有关药动学参数。结果 单剂量口服给药盐酸托莫西汀胶囊20 mg后，其平均血药质量浓度-时间曲线拟合符合二室模型，T1/2、Tmax、Cmax、AUC0-24、AUC0-∞分别为(4.55±0.79)h、(1.33±0.48)h、(225.18±48.53)μg·L-1、(971.34±219.52)μg·L-1·h和(992.60±229.93) μg·L-1·h。结论 建立的托莫西汀人体内血药浓度测定方法灵敏、可靠、简便，盐酸托莫西汀胶囊单剂量给药后在 中国 健康人体内的药动学行为与国外 　　2.5 样品测定 　　2.5.1 色谱条件 色谱柱：Agilent Eclipse Plus C18(150 mm×2.1 mm，5 μm);流动相：乙腈(含0.2%甲酸)水(含0.02 mol·L-1甲酸铵)(体积比80∶20);流速：0.3 mL·min-1;柱温：40 ℃。质谱条件：电喷雾电离源(ESI)，正离子化，扫描方式为选择性离子监测，托莫西汀m/z 256.1→44.1，氟西汀m/z 310.1→44.2，毛细管电压4 000 V，喷雾气压力206.85 kPa，气体流速8 L·min-1，气体温度350 ℃，碰撞能量8单位，裂解电压135 V，四级杆捕捉时间0.2 s， 电子 倍增器300 V。进样量为5 μL。 　　2.5.2 样品处理 取含药血浆0.5 mL置10 mL的带塞磨口锥形玻璃离心管中，加入3 000 μg·L-1的氟西汀甲醇溶液50 μL，快速振荡3 s，加饱和碳酸氢钠水溶液0.2 mL，快速振荡15 s，再加醋酸乙酯二氯甲烷(体积比4∶1)3 mL，密塞，旋涡振荡1 min，3 000 r·min-1离心10 min，吸取有机层置3 mL的带塞磨口锥形玻璃离心管内，42 ℃真空至干。进样前以200 μL流动相复溶，3 500 r·min-1离心10 min，吸取上清液5 μL进样。 　　2.5.3 方法专属性 分别取6名受试者的空白血浆0.5 mL 置10 mL的带塞锥形玻璃离心管中，除不加内标外，按“2.5.2”项依法操作，进样5 μL，获得空白血浆样品的色谱图，如图1(A);将一定浓度的对照品溶液和内标溶液加入空白血浆中，依同法操作获得相应的色谱图1(B)，托莫西汀、氟西汀的出峰时间分别约为1.24 min和1.26 min;取健康受试者给药后收集的血浆样品，依同法操作，得色谱图1(C)。结果表明，空白血浆中内源性物质不干扰托莫西汀及内标氟西汀的测定。 　　2.5.4 标准曲线的制备和最低定量限的确证 取空白血浆0.5 mL，分别加入质量浓度为10、20、50、100、500、1 000、5 000、10 000和15 000 μg·L-1的托莫西汀对照品溶液50 μL，振荡3 s，使血浆药物质量浓度分别相当于1、2、5、10、50、100、500、1 000和1 500 μg·L-1，其余按“2.5.2”项处理。经HPLC/MS/MS分析，以托莫西汀峰面积与内标峰面积之比(y)为纵坐标，以血浆托莫西汀浓度与内标浓度之比(x)为横坐标，权重系数为1/x2，得回归方程为y=0.5821x-2.5814×10-4，r=0.997 5(n=9)，表明血浆中托莫西汀质量浓度在1～1 500 μg·L-1范围呈良好的线性关系。血浆样品托莫西汀定量下限质量浓度为1 μg·L-1(S/Ngt;14)，平行对5个质量浓度为1 μg·L-1的含药血浆样品处理后进行色谱分析，其方法回收率为101.82%，RSD为4.96%。 　　2.5.5 回收率及精密度试验 按“2.5.4”项方法分别配制低(2 μg·L-1)、中(100 μg·L-1)和高浓度(1 000 g·L-1)的托莫西汀血浆溶液各15份，分为3批，每批5份，并与每批的标准曲线同时进行，依“2.5.2”项方法处理后取5 μL进样，测定精密度，并 计算 质控样品的测得浓度，与配制浓度对照，求得方法回收率(见表1)。同法以空白血浆，除不加标准系列溶液和内标外，按“2.5.2”项方法处理后，再加入相应浓度的托莫西汀和氟西汀，取5 μL上清液进样，以每一浓度两种