解脂耶氏酵母不对称还原苯乙酮合成（R）-苯乙醇.pdfVIP

学兔兔 化 工 进 展 ·528· CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING PROGRESS 2016年第35卷第2期 解脂耶氏酵母不对称还原苯乙酮合成( ．苯乙醇 许芹，王丹，徐晴，李霜 (南京工业大学生物与制药工程学院，江苏 南京 210009) 摘要：为了提高解脂耶氏酵母对苯乙酮的催化效率，以20mmol／L的苯乙酮和苯乙醇为筛选压力，采用紫外诱变 获得突变株，优化了反应体系参数，如温度、pH值、辅助底物、有机溶剂(如甲苯、己烷、辛烷、DMF、DMSO 等)以及离子液体(1-丁基一3．甲基咪唑六氟磷酸盐，BMIM·PF6)等对催化体系的影响。结果表明，利用解脂耶 氏酵母突变株全细胞催化苯乙酮(20mmol／L)合成 )．苯乙醇，转化率76％，P．e．达99．2％。优化后的反应体系 如下：最适辅助底物为葡萄糖，反应温度 30℃，pH=7．0，30％(体积分数)疏水性离子液体 BMIM·PF6。当利 用解脂耶氏酵母突变株的发酵液为催化体系，向反应体系中添加 30％(体积分数)BMIM·PF6，以 60mmol／L 苯乙酮为底物，反应36h， )．苯乙醇的转化率达95％，P．e．值达97％。解脂耶氏酵母突变株全细胞催化苯乙酮不 对称还原反应，在高底物浓度、高转化率以及高光学纯度等方面具有突出表现。 关键词：解脂耶氏酵母；苯乙酮； )一苯乙醇；生物催化；酶；优化 中图分类号：Q 503 文献标志码：A 文章编号：1000—6613(2016)02—0528—06 DoI：10．16085~．issn．1000-6613．2016．02．028 Asymmetric reduction of acetophenone to㈣-phenyl ethanol by Yarrowia tivotica XUQin，WANGDan，XUQing，LIShuang (College ofBiotechnology and Pharmaceutical Engineering，Nanjing Tech．University，Nanjing 21009，Jiangsu，China) Abstract：In order to improve Yarrowia lipolytica’S catalytic efficiency for acetophenone，using 20mmol／L acetophenone and 20mmol／L phenyl ethanol as screening pressure，we obtained a mutant strain through UV mutation．Then we optimized the reaction conditions，such as temperature，pH， CO．substrate and organic solvents．The mutant strain Yarrowia lipolytica ACA—DC 50 1 09．H could reduce 20mmol／L acetophenone to optical pure )一phenyl ethanol(76％conversion，99．2％P．e．)．The optimal reaction conditions were using glucose as co—substrate，and with t=30℃，pH=7．0 and the addition of 30％(v／v)ionic 1iquid fBMIM‘PF6)．When the culture broth of Yarrowia