猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)抗体ELISA检测方法的建立与初步应用.pdfVIP

Vo l. 31 No. 4 第 31 卷第4 期 实验动物科学 2014 年 8 月 LABORATORY ANIMAL SCIENCE August 2014 P A VV 也 研 P 。 。 报O 。 辞 告 4 A 7 40 可 A 猫癌挺多病毒 I 型(FHV-l )抗体 ELISA 检测方法的 建立与初步应用* 王吉卫礼付瑞李晓波王淑菁巩薇岳秉飞贺争鸣 (中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所、国家实验动物微生物、遗传检测中心，北京 10∞50) 摘要:目的 建立猫痕彦病毒 I 型(FHV-1) 抗体 ELISA 检测方法，应用于临床样品中 FHV-l 抗体的检测。方法 培养猫肾传代细胞(CRFK) ，接种 FHV-l 病毒，制备 CRFK 正常抗原和 FHV-l 特异抗原，滴定山羊抗猫 IgG-HRP 和 抗原最佳工作浓度，并进行特异性、敏感性、稳定性及精密性实验。结果 正常抗原、特异抗原和酶结合物最佳工 作浓度分别为 0.05μg/mL， 10 附ImL 和 1:5000;正常抗原、特异抗原批内变异系数分别为 8.7% 和 5.8% ，批间平 均变异系数分别为 1 1. 9J毛和 6.6% ;检测灵敏度为 1:6400; 与猫细小病毒(FPV) 、猫杯状病毒( FCV) 均无交叉反 应。稳定性试验相对偏差小于 25 J毛。结论 建立的 ELISA 方法重复性、稳定性好，特异性、敏感性强，可用于猫 FHV-l 抗体的检测。 关键词:猫痕彦病毒 1 型; ELlSA;猫 中图分类号: Q95 - 33 文献标识码:A 文章编号: 1006 - 6179 (2014 )04 -0001 -05 猫殖彦病毒 I 型 (feline herpesvirus 1 , FHV -1 ) 又称猫鼻气管炎病毒(feline rhinotracheitis virus) ，属 1 材料和方法 瘪摩病毒科，是有囊膜的双链 DNA 病毒。直径约为 128一168 nm ，能在猫胚肾、肺以及辜丸细胞培养物 1. 1 主要材料 内良好增殖和传代。该病毒主要侵害仔猫，感染症 猫癌彦病毒 I 型( FHV -1) C-27 株(编号: VR- 636 ，美国 ATCC) ;CRFK 细胞(中国科学院上海生科 状严重时，出现体温升高，明显的上呼吸道感染症 状[1-3] 。该病毒可通过直接接触传播[I] ，发病率可 院细胞资源中心) ;山羊抗猫 IgG-HRP (美国 Southern Biotech 公司) ;商品化 FHV-1 ELlSA 抗体 达 100% ，死亡率可达 50% 。该病最早发现于美国， 检测试剂盒、FHV-1 标准阴、阳对照血清、猫细小病 随后在拿大、英国、荷兰、瑞士、匈牙利、越南等地发 现和流行，我国也多次发现可疑病例，并分离到 毒(feline panleukopenia virus ， FPV) 阴、阳对照血 病毒[4一飞 清、猫杯状病毒(feline calicivirus ,FCV) 阴、阳