间充质干细胞体内成骨的实验研究.docVIP

　　间充质干细胞体内成骨的实验研究 作者：李章华，彭昊，廖文，张玉富，赵强，王常勇 【关键词】 组织工程化骨 　　摘 要：［目的］探讨间充质干细胞在体内的成骨能力。［ 方法 ］从羊髂嵴处抽取10~15 ml骨髓组织，用Percoll分离液按梯度离心法分离出间充质干细胞，培养、增殖后种植在多孔β磷酸三钙上，构建组织工程化骨，植入8只羊的左后肢跖骨缺损区（长21 mm）作为实验组；单纯植入多孔β磷酸三钙陶瓷材料的8只羊作为对照组；分别在术后6、12、24周处死动物行放射学、组织学和生物力学检测。［结果］放射学和组织学检测，术后6周实验组即可见有新骨生成，对照组则无明显新骨生成；骨缺损部位新生骨样组织、编织骨和板状骨出现的时间实验组也都较对照组早，并且不经软骨介导即能直接成骨，而对照组从两端以“爬行替代”方式成骨。术后24周，放射学和生物力学检测显示实验组骨缺损几乎完全修复，对照组只有部分愈合。［结论］间充质干细胞不仅在体外具有良好的增殖能力，回植入体内后仍然具有良好的成骨能力，不需经过软骨过程就能直接形成新骨，显示了间充质干细胞作为骨组织工程种子细胞良好的 应用 前景。 关键词：组织工程化骨； 骨缺损； 新生骨； 间充质干细胞 Abstract：［Objective］To investigate the osteogenic ability in vivo of mesenchymal stem cells（MSCs）［Method］Tenfifteen ml bone marro the iliac crest of sheep and enriched for MSCs by density gradient centrifugation over a Percoll cushion（1073 g/ml）After cultured and proliferated,the tissueengineered bones phosphate ceramics（13TCP） The n,the constructs planted into left metatarsus defect（21 mm in length）of 8 sheep as an experimental groupPorous βTCP posed arroplanted into defects of same size and position in 8 sheep as a control groupSheep planted samples ined by radiograph,histology,and biomechanical analysis［Result］Neental group as early as the 6th ed in a direct manner ediately,osteoid tissue,ellar bone,occurred earlier in the experimental group than in the control group,in annerAt the 24th echanical tests revealed an almost plete repair of the defect in experimental group,but only a partial repair in the control group［Conclusion］MSCs have good reproductive activity not only in vitro,but also in vivoThe need in a direct manner ediately onstrated that MSCs al stem cells 迄今为止，大节段的骨缺损修复仍然是骨科医生面临的巨大挑战。现有的自、异体骨移植法都有一定的局限性，因此有必要寻找一种新的修复骨缺损的方法。多孔β磷酸三钙陶瓷具有良好的生物降解性、生物相容性，而且无毒性，结构稳定并适合细胞生长，因而是骨组织工程理想的支架材料〔1〕。然而，为了增加材料的生物活性还需要增加一些刺激骨生长的物质，包括骨髓、干细胞、成骨细胞、骨形态蛋白等。骨髓细胞中包括有造血干细胞和具有成骨潜能的间充质干细胞，这种干细胞具有多向分化潜能，故而能分化为骨、软骨、肌腱、肌肉、脂肪和造血基质等多种组织。本 研究 的目的就是探讨间充质干细胞在体内的成骨能力。 1 材料与方法 11 材 料 111 实验用品 LDMEM（Gibco，BRL，USA），胎牛血清（FCS，Gibco，BRL，USA），其它化学用品均购自Sigma公司。多孔β磷酸三钙陶瓷由法国地中