直肠癌远侧端黏膜p53的表达及其意义.docVIP

　　直肠癌远侧端黏膜p53的表达及其意义 作者：涂小煌　王为忠　王烈　黎成金　宋京翔　宋丽娜　赵春雷 【摘要】 目的: 从分子病 理学 水平上探讨直肠癌的安全远侧切缘。 方法 ：对45例中低位直肠腺癌下缘进行标记，PET/CT检查结合半定量免疫组织化学方法对直肠癌的远侧端黏膜p53表达进行 研究 。结果：直肠癌及远侧端直肠黏膜均可见p53表达，直肠癌组织中p53表达明显高于远侧端的直肠黏膜组织。直肠癌远侧端黏膜p53表达随着距离增大而减少，但有显著性异常改变只在有限的长度内（远侧端1.5 cm），阴性对照中仍有p53的表达。肿瘤组织及直肠远侧端黏膜中p53表达与肿瘤大小、分期以及病理类型无关。结论：直肠腺癌远侧1.5 cm长度的组织, p53明显异常表达, 若从分子病理学角度来界定，2 cm的直肠远侧端长度是安全的远侧切缘。 【关键词】 直肠肿瘤 全直肠系膜切除术 p53 PET/CT Expression of p53 and its significance in rectal distal mucosa of rectal cancer 【ABSTRACT】 Objective: To explore the required distal margin of radical surgery for rectal cancer in molecular pathologic level. Methods: Forty-five cases of rectal cancer arked before operation，and then aging；p53 expression in rectal distal tissue portion munohistochemical techniques. Results: p53 expression in rectal cancer ucosa distal to cancer. p53 expression ucosa more than 1.5 cm distal to the cancer and the mucosa of negative control rectal tissue. It rectal mucosa distal to the cancer could remove obvious abnormity tissue of p53 expression. 【KEY E）保肛手术［１］,切除肿瘤，解剖直肠系膜,观察肿瘤在肠壁及直肠系膜内的浸润情况。于肿瘤的对侧纵行切开直肠壁,轻轻牵拉标本两切端，使肿瘤下缘两标记线的距离与PET/CT上检测的距离一致（ 自然 位置）。用大头钉固定后，分别取肿瘤上缘10 cm处、肿瘤中心、肿瘤下缘至0.5 cm、0.5～1 cm、1～1.5 cm、1.5～2.0 cm、2.0～2.5 cm处宽为0.5 cm的组织，肿瘤下缘各组织分别标记为a、b、c、d和e段,肿瘤中心组织作为阳性对照,肿瘤上缘10 cm处组织作为阴性对照。各组织4%甲醛固定、石蜡包埋、3 μm厚切片，行p53免疫组织化学染色。 1.3　半定量测定　p53为鼠抗人单克隆抗体（即用型），免疫组化试剂盒（EliVisionTM plus广普试剂盒）均为Maixin.Bio公司产品。免疫组织化学PAP法进行染色，p53的阴性对照染色均采用PBS代替一抗，其余步骤均一致。p53蛋白呈棕色颗粒状或团块状分布在黏膜上皮细胞核，200倍光镜观察每张切片10个黏膜固有层区p53阳性表达，半定量评分。免疫组化阳性半定量评分标准：1）阳性产物显色强度评分为阴性0分，弱1分，中等2分，强3分；2）阳性产物分布范围评分标准：≤黏膜固有层总面积的25%为1分，26％~50%为2分，51％~75%为3分，＞75%为4分。该例标本的阳性积分=显色强度×分布范围。1.4　统计学 分析 　 应用 SPSS10.0软件进行统计分析，数据以x±s表示。各组数据间的比较用t检验，P≤0.05为差异有统计学意义。 2　结果 2.1　直肠癌及远侧端黏膜组织的p53的表达　免疫组织化学染色显示，p53在直肠癌组织肿瘤细胞核分布较为均匀，p53阳性肿瘤细胞核大，核分裂像明显，且呈堆积存在，而远侧端黏膜及阴性对照黏膜的p53表达阳性细胞形态与正常细胞相似（图1）。直肠癌组织中p53表达明显高于直肠癌远侧端的黏膜组织；直肠癌远侧端黏膜p53表达随着距离增大而减少，但阴性对照中仍有p53的表达；直肠癌远侧端gt;1.5 cm的直肠黏膜，p53表达与阴性对照无显著性差异（表1）。 2.2　直肠癌各病理类型的p53表达　直肠癌远侧端各段黏膜的p53表达与直肠癌的组织学类型差异无统计学意义（P＞0