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胃癌患者外周血hTERT mRNA转录水平及临床意义.doc
胃癌患者外周血hTERT mRNA转录水平及临床意义
作者:胡福军 凌志强 陈晓钟 余传定 【摘要】 目的 研究胃癌患者外周血中hTERT mRNA的表达,探讨其作为胃癌肿瘤细胞标志物的可行性。方法 应用实时荧光定量RT-PCR技术检测96例原发性胃癌、50例胃溃疡和60例健康献血员血清中hTERT mRNA表达水平,并对阳性PCR产物进行克隆、测序。结果 胃癌组hTERT mRNA表达水平(12.78±0.97) copies/ml,显著高于良性胃溃疡组(0.93±0.23) copies/ml和健康对照组(0.29±0.17) copies/ml。多变量分析表明,hTERT表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤生长方式、肿瘤分化程度、淋巴管侵犯、静脉侵犯均无显著相关性(pgt;0.05),而与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、pTNM分期及CEA有显著相关性(plt;0.05)。结论 qRT-PCR具有快速、敏感和特异的特点。定量分析外周血hTERT mRNA转录水平可作为胃癌的肿瘤细胞标志物之一,用于早期诊断。
【关键词】 胃癌 肿瘤标志物 hTERT mRNA 实时荧光定量RT-PCR
【Abstract】 Objective To investigate the expression and clinical value of human telomerase reverse transcriptase (hTERT) mRNA in the peripheral blood of patients a. Methods Real-time quantitative RT-PCR (qRT-PCR) RNA in 96 gastric cancer, 50 gastric ulcers, and 60 healthy individuals ajor disease. PCR product RNA expression RNA expression had no significant differences in hTERT mRNA or size, tumor grophatic vessels encroachment and vEin encroachment (pgt;0.05), but had a significant betRNA expression level and the depth of tumor infiltration, lymph node metastasis, distant metastasis, TNM staging and CEA values in gastric cancer (plt;0.05). Conclusion Real-time quantitative RT-PCR (qRT-PCR) is a rapid, sensitive and specific method to detect hTERT mRNA. And the hTERT mRNA in the peripheral blood may be a tumor marker of gastric cancer, or marker Hhuman telomerasereverse transcriptase mRNA hTERT mRNA Real-time fluorescence quantitative RT-PCR (qRT-PCR)
胃癌在我国死亡率居恶性肿瘤之首位,但早期诊治的5年、10年生存率分别可达到95%和90%[1]。因此,寻找敏感而特异的肿瘤细胞标志物对胃癌的早期诊治具有重要意义。端粒是真核细胞染色体末端的特殊结构,可稳定维持染色体的功能,防止染色体DNA降解、末端融合,保护染色体结构基因,调节正常细胞生长。端粒长短和稳定性决定了细胞寿命,并与细胞衰老和癌变密切相关[2]。端粒酶(TERT)是使端粒延伸的反转录DNA合成酶,与细胞分裂及寿命控制有密切关系。端粒、TERT对临床肿瘤的诊断和预后判断有一定意义[2]。本研究,应用实时荧光定量RT-PCR(Real-time fluorescence quantitative RT-PCR, qRT-PCR)技术检测胃癌患者外周血hTERT mRNA水平表达,探讨其作为胃癌肿瘤细胞标志物的可行性。
1 材料与方法
1.1 对象
2000年8月至2006年12月手术切除的胃癌组织标本96例,患者男58例,女38例,年龄31~78岁(中位年龄58.2岁),术前均未接受放、化疗;胃溃疡手术标本50例,患者男31例,女19例,年龄37~71岁(中位年龄54.6岁);另取健康献血员6
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