黄连总生物碱纯化工艺研究.docVIP

　　黄连总生物碱纯化工艺研究 作者：许沛虎，高媛，张雪琼，张良，许可 【摘要】 　　目的优选黄连最佳纯化工艺。 方法对影响总生物碱纯化效果的因素进行了系统考察。结果黄连总生物碱的最佳纯化工艺为10倍量0.5%稀硫酸，用石灰乳调pH 9，静置2h，滤过，滤液用盐酸调pH1，加氯化钠使含盐量达10%，静置24h，滤过，沉淀水洗至pH 5。结论 优选的黄连总生物碱纯化工艺稳定可行。 【关键词】 黄连 盐酸小檗碱 总生物碱 纯化 　　Abstract:ObjectiveTo optimize the best purification process of total alkaloids from Rhizoma Coptidis.MethodsThe factors that affect the result of purification to total alkaloids ined.ResultsThe optimum isolation process e of 0.5% sulphuric acid into Rhizoma Coptidis extract, adjusting to pH 9 by lime cream, standing for 2 hours, filtering, adjusting to pH 1 by hydrochloric acid, adjusting the salinity of solution up to 10% by sodium chloride, standing for 2 hours, um purification technology of total alkaloids from Rhizoma Coptidis is simple, stable and feasible. 　　Key a Coptidis; Berberine hydrochloride; Total alkaloids; Purification 　　黄连为毛莨科植物黄连Coptis chinensis Franch.三角叶黄连Coptis deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta g，置25 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取0.5 ～25 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度即得。 　　2.1.2 标准曲线的制备精密吸取对照品溶液1，2，3，4，5 ml，至10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，以1%盐酸甲醇液为空白对照，于349 nm波长处测定吸收度。以对照品浓度为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线，经回归处理，回归方程为：A=0.084 3C＋0.013 6，r=0.999 4。盐酸小檗碱的浓度在2.296 ～11.48μg/ml的范围内线性关系良好。 　　2.1.3 测定取黄连提取物约0.05 g，精密称定，置100 ml具塞锥形瓶中，精密加入50 ml 1%的盐酸甲醇液，称定重量，超声处理30 min，取出，放冷，再称定重量，用1%的盐酸甲醇液补足重量，滤过，精密量取续滤液0.2 ml，置25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。以1%盐酸甲醇液为空白对照，于349 nm波长处测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中盐酸小檗碱的浓度， 计算 ，即得。 　　2.2 盐酸小檗碱的测定 　　2.2.1 对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品28.7 mg，至25 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2 ml至25 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即得。 　　2.2.2 标准曲线的制备精密吸取对照品溶液1，2，3，4，5 ml置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别吸取各稀释液10 μl，注入高效液相色谱仪，测定峰面积。以进样量和峰面积的进行回归计算，计算回归方程为Y=2 076.9X+5.44，r=0.999 8。结果表明在0.091 84 ～0.459 2 μg范围内，盐酸小檗碱峰面积值与进样量有良好的线性关系。 　　2.2.3 测定取黄连提取物约0.05 g，精密称定，置100 ml具塞锥形瓶中，精密加入50 ml甲醇，称定重量，超声处理30 min，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足重量，滤过，精密量取续滤液0.5 ml，置25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。测定峰面积，从标准曲线上读出供试品溶液中盐酸小檗碱的浓度，计算，即得。 　　2.2.4 黄连提取物的制备黄连药材粉碎成粗粉，分别加10倍量70%乙醇回流提取3次，1 h/次，分次过滤，合并滤液。于60℃下减压浓缩，干燥（60℃）。 　　2.3 纯化条件考察 　　2.3.1 硫酸浓度考察提取小檗碱时，以稀硫酸为溶媒，使其转换