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微观技术课程2D文稿
微观技术 马玉堃 生命科学学院 2007年3月 * 2 目镜 目镜的组成 目镜通常由2个透镜组成。上面一个与眼睛接触的叫接目透镜,下面一个靠近视野的叫会聚透镜或视野透镜。在上下透镜中间,或在视野透镜的下面装一个用金属制的光阑,物镜或视野透镜就在这个光阑面成像。在此可以安装目镜测微计或用眼睫毛粘贴在光阑上制成指针目镜。 目镜的效用 1)使由物镜映来的倒像,反映在目镜的光阑上,并使它再扩大成为直立的虚像。 2)可校正物镜所余下来的色差及球面差,以及补正映像的歪曲。 3)使映像投射到一定的位置上,便于做显微镜照相。 目镜的放大 目镜的放大倍数计算: 目镜的放大倍数=250mm(明示距离)/fmm(目镜焦距) 目镜的焦距一般在出品目录上都已注明,若焦距为36毫米,则目镜放大倍数为7Х,这个数字在镜头上注明。在实验室常用的目镜倍数为10Х。若与40的物镜配合使用,则此显微镜的放大倍数为10Х40=400Х。 目镜的类型 负目镜 结构如图1-7A,最常见的一种。它是由2个平凹透镜组成。在2个透镜之间,有一个圆形的光阑。在下面的一个视野透镜,其凸面向下,作用是聚会来自物镜的光线,使之聚焦成像在光阑附近。上面透镜也是凸面向下,作用是放大映象为眼睛接受。 正目镜 这种目镜也是由2个平凸面透镜组成,如图1-7B。其凸面相对,光阑也移动到视野透镜的下面。 补偿目镜 结构比较复杂,它在焦点平面上端插入了一组消色透镜,如图1-7C。这是专门为复消色差物镜设计的。因为在视野周围仍然出现色差,如果单独使用复消色差物镜,仍不能全部消除,所以就与补偿目镜配合使用以达到消除残留色差的目的。 3 集光器 集光器的效用 集光器是显微镜光学系统中的重要组成部件。其功能是收集从光源来的光线并集合成光束,以增强照度,然后经过标本再射到物镜中去。所以一般放大倍数较高的显微镜,在载物台下面均有集光器。 集光器的组成 集光器一般由2个或3个凸透镜组成,上面的透镜是平面的,如图1-8。一般显微镜都装备有阿贝氏照明装置,它是由集光器、彩虹光圈和反射镜三者联合而成,装在镜台之下的支架上,利用齿轮和齿条升降,可调节光的强弱。在更高级的研究显微镜中,另外装有三个以上透镜组成的消错性集光器。能消除球面色差和色象差。图1-9。 集光器的用法 欲使显微镜发挥它的能力,除了有高级物镜外,还必须有优良的集光器配合使用,因为物镜的分辨力受集光器镜口率的影响。 物镜的有效镜口率等于镜口率加集光器镜口率再除以2。 例如:镜口率为1.2,如与镜口率为0.5的集光器配合使用,则物镜的有效镜口率为0.85,即,物镜的有效镜口率=1/2(物镜的镜口率+集光器镜口率)=1/2(1.2+0.5)=0.85。 因此,在使用集光器时应该注意以下几点: 原则上,集光器的镜口率应该与物镜的镜口率一致。通常集光器上刻有最大镜口率的数值,如N.A.1.0,1.2,1.4等。应该根据情况来调整。 集光器镜口率在1.0以上时,要用香柏油浸没在集光器上面的透镜与载玻片之间,以便使高倍物镜发挥作用。 若照明光线过强时,可以降低集光器或缩小光圈,但都会减低显微镜的分辩力。所以最好是改变电灯的亮度,或利用深色滤光片或增加滤光片数量。 若检查的标本是活体或没有染色,则需要缩小集光器下的光圈。因为照明的光束越小,明暗对比越明显。 显微镜的放大率:也称放大倍数。显微镜的总放大倍数等于目镜和物镜的放大倍数的乘积。公式为: M为总放大倍数, K1为物镜放大倍数, K2为目镜放大倍数, Δ为光学镜筒长(单位:mm),f1为物镜焦距(单位:mm), f2为目镜焦距(单位:mm), 250为明视距离(单位:mm)。 由公式可知,物镜的放大率是对一定镜筒长度而定的,镜筒长度的变化,不仅放大率随之变化,而且成像也受到影响。因此使用显微镜时,不能任意改变镜筒的长度。所谓标准光学镜筒长是指物镜的后焦点与目镜的前焦点之间的距离。国际上将显微镜的标准镜筒长定为160mm,此数字标刻在物镜的外壳上。 第三节 显微镜的照明原理 以投射光为照明光,显微镜有2种照明方式: 一种为临界照明,光源经扣光镜后会聚在被检物体上,光束窄而强,这是它的优点.但是光源的灯丝像与被检物体的平面重合,这样就造成被检物体的照明呈现不均匀性,在有灯丝的地方明亮,无灯丝的地方暗淡,不仅影响质量,也影响照相. 另一种为柯拉照明,照明光路有许多组件,包括光源、集光器、视场光栏、孔径光栏、集光器和物台等。在此照明中, 集光器透镜的2侧,灯丝和孔径光栏为一共轭面. 灯丝的成像在孔径光栏平面上. 集光器透镜的2侧视场光栏和物台为一共轭面,视场光栏的像呈现在物台上.因此,比临界照明优越.一是照明均匀,二是通过调整视场光栏大小和位置可以控制标本平面上照明区的大小和位置。当只需
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