第二章 酶的.ppt

Chapter Two 酶的生物合成法生产 Section 1 基本概述 一、酶的生物合成法生产概念 1、酶的生物合成 2、酶的发酵生产 3、酶的生物合成法生产 二、优良的产酶细胞应具备的条件 1、酶的产量高； 2、易培养和管理； 3、产酶稳定性好； 4、利于分离纯化； 5、安全可靠等。 Section 2 酶生物合成的基本理论 一、RNA的生物合成 — 转录 二、蛋白质的生物合成 — 翻译 三、酶生物合成的调节 1、操纵子学说： 2、分解代谢物阻遏作用： 3、诱导作用——乳糖操纵子： 4、反阻遏作用——Trp操纵子： Section 3 微生物发酵产酶 一、概念及其类型 1、概念： 2、类型： ①固体发酵法：又称固体培养发酵或麸曲培养法。又包括：1）浅盘法；2）转桶法；3）厚层通气法等。 ②液体发酵法：又包括：1）液体表面发酵法；2）液体深层通气发酵法。 ③固定化细胞发酵： ④固定化原生质体发酵： 二、常用的产酶微生物 ①枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)： ②大肠杆菌(Escherichia coli)： ③黑曲霉(Aspergillus niger)： ④米曲霉(Aspergillus orgzae)： ⑤青霉(Penicillium)： ⑥木霉(TrichodPrma)： ⑦啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)： 等等。 三、发酵工艺条件及其控制 1、细胞活化与扩大培养 2、培养基的配制： ①碳源: ②氮源: ③无机盐: ④生长因子等。 3、pH值的调节控制： 4、温度的调节控制： 5、溶解氧的调节控制： 四、提高酶产量的措施： 1、添加诱导物： ①酶的作用底物 ②酶的反应产物 ③酶的底物类似物： 2、控制阻遏物的浓度： 3、添加表面活性剂： 如：吐温(Tween)、特里顿(Triton)等， 4、添加产酶活性剂： 五、酶发酵动力学 1、酶生物合成的模式： ①同步合成型：酶的合成与细胞生长同步进行。当细胞进入对数生长期，酶大量产生；细胞生长进人平衡期后，酶的合成随之停止。 ②延续合成型：酶的合成伴随着细胞的生长而开始，但在细胞生长进入平衡期后，酶还可以延续合成较长的一段时间。 ③中期合成型：酶的合成在细胞生长一段时间以后才开始，而在细胞进入平衡期后，酶的合成也随之停止。 ④滞后合成型：只有当细胞生长进人平衡以后，酶才开始合成并大量积累。 2、细胞生长动力学： 在培养过程中，细胞生长速率与细胞浓度成正比： 式中: rX——细胞生长速率 X-----细胞浓度 μ——比生长速率 当培养物中只有一种限制性基质，而不存在其它限制生长的因素时，μ为此限制性基质浓度的函数，这就是Monod生长动力学模型： 3、产酶动力学 产酶动力学主要研究细胞产酶速率以及各种因素对产酶速率的影响。 宏观产酶动力学与细胞比生长速率和细胞浓度以及细胞产酶模式有关。一般产酶动力学方程可表达为： 式中 X-----细胞浓度 μ----细胞比生长速率 α----生长偶联的比产酶系数 β----非生长偶联的比产酶速率 E-----酶浓度 t-----时间 Section 4 固定化微生物细胞发酵产酶 一、固定化微生物细胞发酵产酶的特点： 二、固定化微生物细胞发酵产酶的工艺条件控制： 三、固定化微生物细胞生长和产酶动力学： Section 5 固定化微生物原生质体发酵产酶 一、固定化微生物原生质体的特点： 二、固定化微生物原生质体发酵产酶的工艺条件控制： 六、微生物发酵产酶实例 1、酸性蛋白酶的生产 2、a-淀粉酶的生产 Section 6 植物细胞培养产酶 一、植物细胞的特性（与动物及微生物细胞比较）： 二、植物细胞培养的特点： 1、提高产率 2、缩短周期 3、易于管理 4、提高产品质量 5、缺点： 三、植物细胞培养产酶的工艺条件及其控制： 1、植物细胞培养产酶的工艺流程 2、植物细胞培养的培养基 3、温度的控制 4、pH值的控制 5、溶解氧的调节控制 6、光照的控制 7、前体的添加 8、刺激剂的应用 四、植物细胞培养产酶实例： Section 5 动物细胞培养产酶 一、动物细胞的特征（与植物及微生物细胞比较）： 二、动物细胞培养的特点： 三、动物细胞培养方式： 1、悬浮培养 2、贴壁培养 3、固定化细胞培养 四、动物细胞培养产酶的工艺条件及其控制： 1、