高效液相色谱仪(HPLC)的保养-1.pdfVIP

高效液相色谱仪(HPLC)的保养 1 HPLC的环境设置： HPLC的日常操作条件：温度：10～ 30℃；相对湿度80％； 最好是恒温、恒 湿，远离高电磁干扰、高振动设备，有良好 的通风设施。 2 HPLC用水可以通过以下几个方面来得 到： 1 专门的纯水机或超纯水机； 2 去离子水重蒸； 3 二次或三次重蒸水； 4 采用类似家用的纯水机； 5 市场上瓶装的纯净水或蒸馏水； 6 其它途径； 3 不管采用何种途径，配制流动相应用新鲜 水，水质越高放置时间越短。 理想的HPLC用水应为18.2Ω的超纯水，并通 过0.22um的滤膜，除去热源、有机物、无机离 子及空气等。 4 HPLC六通阀进样器的使用及保养 六通阀进样器是高效液相色谱系统中 最理想的进样器，它是由圆形密封垫(转子) 和固定底座(定子)组成。美国Rheodyne公 司的六通阀进样器最为通用，各大HPLC仪 器制造商均以此产品作为仪器的进样器。 5 工作原理 手柄位进样(Load)位置时，样品经微量进 样针从进样孔注射进定量环，定量环充满后， 多余样品从放空孔排出； 将手柄转动至进样(Inject)位置时，阀与 液相流路接通，由泵输送的流动相冲洗定量 环，推动样品进入液相分析柱进行分析。 6 虽然六通阀进样器具有结构简单、使用 方便、寿命长、日常无需维修等特点，但正 确的使用和维护将能增加使用寿命，保护周 边设备，同时增加分析准确度。如使用得当 的话，六通阀进样器一般可连续进样3万次而 无需维修。 7 手柄处于Load和Inject之间时，由于暂时 堵住了流路，流路中压力骤增，再转到进样位， 过高的压力在柱头上引起损坏，所以应尽快转动 阀，不能停留在中途。在HPLC系统中使用的注射 器针头有别于气相色谱，是平头注射器。一方 面，针头外侧紧贴进样器密封管内侧，密封性能 好，不漏液，不引入空气；另一方面，也防止了 针头刺坏密封组件及定子。 8 六通阀进样器的进样方式有部分装液法和 完全装液法两种。使用部分装液法进样时，进 样量最多为定量环体积的75％，如20μl的定量 环最多进样15μl的样品，并且要求每次进样体 积准确、相同；使用完全装液法进样时，进样 量最少为定量环体积的3至5倍，即20μl的定量 环最少进样60至100μl的样品，这样才能完全 置换样品定量环内残留的溶液，达到所要求的 精密度及重现性。推荐采用100ul的平头进样针 配合20ul满环进样。