改性PVA壳聚糖复合小球的合成及其用于固定化过氧化氢酶.pdfVIP

目 录 第一章 前言1 第二章 文献综述3 2.1 酶的固定化3 2.1.1 固定化酶概述3 2.1.2 酶的固定化方法4 2.1.3 固定化酶的应用5 2.2 过氧化氢酶6 2.2.1 过氧化氢酶简介6 2.2.2 过氧化氢酶的应用8 2.3 固定化酶载体9 2.3.1 固定化酶载体简介9 2.3.2 固定化酶载体的改性及活化10 2.3.3 壳聚糖用作固定化酶载体 11 2.3.4 聚乙烯醇用作固定化酶载体12 2.4 本章小结13 第三章 材料的改性及固定化过氧化氢酶15 3.1 实验试剂与仪器15 3.2 实验方法16 3.2.1 聚乙烯醇的改性16 3.2.2 改性聚乙烯醇/壳聚糖复合载体小球的合成16 3.2.3 固定化过氧化氢酶的制备17 3.2.4 固定化过氧化氢酶负载量测定17 3.2.5 过氧化氢酶活性的测定18 3.2.6 载体的吸水溶胀性测定19 3.2.7 载体及固定化酶的红外表征19 3.2.8 载体及固定化酶的SEM 表征20 3.3 实验结果与讨论20 3.3.1 过氧化氢及牛血清蛋白标准曲线20 3.3.2 载体的吸水溶胀性22 i 3.3.3 载体及固定化酶的红外表征结果24 3.3.4 载体及固定化酶的SEM 表征结果28 3.3.5 APTES 加入量对固定化酶的影响30 3.3.6 戊二醛浓度对固定化酶的影响32 3.3.7 酶浓度对固定化酶的影响34 3.4 本章小结36 第四章 固定化过氧化氢酶性质的研究37 4.1 实验试剂与仪器37 4.2 实验方法37 4.2.1 过氧化氢酶活性的测定37 4.2.2 温度对过氧化氢酶活性的影响37 4.2.3 pH 对过氧化氢酶活性的影响38 4.2.4 表面活性剂及氧漂稳定剂对过氧化氢酶活性的影响38 4.2.5 乙醇对过氧化氢酶活性的影响38 4.2.6 过氧化氢酶的温度热稳定性38 4.2.7 过氧化氢酶的pH 稳定性39 4.2.8 过氧化氢酶的贮藏稳定性39 4.2.9 固定化过氧化氢酶的重复实用性39 4.3 实验结果与讨论39 4.3.1 酶的最适温度及pH 39 4.3.2 氧漂稳定剂和表面活性剂对酶活的影响42 4.3.3 乙醇对酶活的影响43 4.3.4 酶的热稳定性44 4.3.5 酶的pH 稳定性46 4.3.6 酶的贮藏稳定性48 4.3.7 酶的重复使用性50 4.4 本章小结50 第五章 结论52 参考文献54 发表论文和参加科研情况说明62 致 谢63 ii