肺癌患者血清单核细胞趋化蛋白1含量和活性的变化及其意义.docVIP

肺癌患者血清单核细胞趋化蛋白1含量和活性的变化及其意义 作者：王达安 程少冰 卢康荣 【摘要】 目的 探讨肺癌患者血清单核细胞趋化蛋白1(MCP1)含量和单核细胞趋化活性（MCA）的变化 规律 。方法 采用ELISA测定肺癌组和健康对照组血清MCP1的含量,并以Boyden小室趋化实验测定两组血清MCA。结果 肺癌组血清MCP1含量明显高于健康对照组(P0.01),但肺癌组血清MCA却明显低于健康对照组(P0.01)。肺癌组血清MCP1含量与MCA的相关系数(r=0.39)明显低于健康对照组(r=0.87)。结论 肺癌患者存在单核细胞趋化活性不足。 【关键词】 肺肿瘤；单核细胞趋化蛋白1；单核细胞趋化活性 　　单核细胞趋化蛋白1（MCP1）是具有广泛作用的多功能细胞因子，在抗肿瘤免疫这一多细胞参与的反应中的作用日益受到重视〔1，2〕。但肺癌患者MCP1含量、活性的变化，尚未见 文献 报道。本实验拟通过比较肺癌患者与健康者血清MCP1的含量及单核细胞趋化活性（MCA）的差异,探讨MCP1和MCA变化在肺癌发病中的作用。 　 　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　随机选择住院或门诊肺癌病人60例，依据其病史、症状体征、辅助检查和支气管镜活检病理结果诊断,年龄36～62〔平均（48.2±11.6）〕岁，男32例，女28例。另选择参加日常体检的健康者（非吸烟者）58例作为健康对照组，年龄38～59〔平均(46.7±9.4)〕岁，男31例，女27例。 　　1.2 方法 　　1.2.1 标本采集 　　肺癌组及健康对照组均于清晨空腹抽取静脉血4 ml,离心分离出血清，置-70保存，备作MCP1及MCA测定。 　　1.2.2 MCP1含量测定 　　用ELISA法测定，试剂盒由美国Genzyme公司提供;操作按试剂盒说明书进行。 　　1.2.3 MCA测定 　　用Boyden小室法测定〔3〕：用1 mmol/L 82溴cAMP (Sigma，美国) 诱导培养U937 人前单核细胞株(中科院上海细胞所)；48 h 后用4 μm 孔径的Boyden 小室迁移系统进行趋化实验。上室加0.2 ml U937 细胞悬液,细胞量为1×105，下室放有0.6 ml测试样品(肺癌组及健康对照组血清)。37、5% CO2孵育90 min。固定、苏木素染色，光镜下单核细胞计数。趋化单位（U）= 下室单核细胞数/上室单核细胞数（100%）。 　　1.3 统计学处理 　　采用SAS8.0软件包进行统计学分析，数据以x±s表示，两组样本均数比较采用t检验；两指标相关关系采用直线相关分析。 　　 2 结 果 　　2.1 两组血清MCP1含量及MCA比较 肺癌组患者血清MCP1及MCA水平较健康对照组增高(P＜0.01)，见表1。表1 两组血清MCP1含量及MCA比较(略) 　　2.2 两组血清MCP1含量与MCA的关系 　　健康对照组和肺癌组血清MCP1含量与MCA之间均呈正相关(r分别为0.87、0.39，均P0.01)。 　　3 讨 论 研究表明MCP1是体内炎性浸润模型中引起单核细胞聚集的唯一因素〔2〕。MCP1可调节黏附分子β2、α4整合素及白细胞黏附分子 1的细胞表面表达,以膜结合形式调节多种黏附分子的活性,促使各种炎症细胞，尤其是单核细胞向病变部位聚集。因此MCP1能诱导血液中的单核细胞发生迁移并聚集在病变部位发挥生物效应，从而在机体防御、炎症反应及抗肿瘤方面起重要作用。MCP1对Ｔ细胞也具有趋化作用，实验证明MCP1可刺激Ｔ细胞克隆增殖并分泌IL2,Ca2+和IL2的协同作用可增加可溶性CD25表达,促进Ｔ细胞生长〔4〕。MCP1能诱导细胞毒性T细胞（CTL）脱颗粒和释放酯酶,促使辅助性T细胞（TH1和TH2）克隆化,释放多种淋巴因子,上调Ｔ细胞功能,增强机体免疫反应。MCP1是对 自然 杀伤细胞（NK细胞）作用最强的β亚族趋化因子,与细胞表面G蛋白受体结合后，能诱导NK细胞趋化移动。MCP1促使NK细胞脱颗粒及释放溶菌酶,介导对靶细胞的杀伤作用,并剂量依赖性地增强其细胞溶解活性。 　　目前认为MCP1在抗肿瘤免疫中起重要作用。虽然MCP1本身对肿瘤细胞并不直接引起细胞毒反应,但肿瘤产生的MCP1被认为是肿瘤相关巨噬细胞聚集的重要原因。实验证明产生高水平MCP1的肿瘤组织中，巨噬细胞瘤内浸润总数量增多，且肿瘤接种指数较低，肿瘤侵袭速度较缓慢。MCP1还通过激活T细胞、NK细胞等免疫细胞，促进多种细胞因子和介质的分泌，直接和间接识别和攻击肿瘤，抑制肿瘤生长、转移。Huang等〔5〕将表达MCP1的纤维母细胞和肾癌细胞共同接种动物,发现混合接种能抑制肿瘤生长和转移。MCP1表达细胞的培养上清在脂多糖（LPS）作用下,能