何首乌抗诱变作用实验研究.pdf

何首乌抗诱变作用的实验研究 1 2 1 董小艳 ，易燕锋 ，赵刚 1 湖北中医学院基础医学部，湖北武汉 （430061 ） 2 浙江湖州师范学院医学院，浙江湖州（313000 ） E-mail：317171582@ 摘 要： 目的 系统研究何首乌的抗诱变作用及剂量效应。方法 采用小鼠骨髓细胞微核 （MN ）实验和染色体畸变（CA ）实验、人体外周血淋巴细胞姐妹染色单体交换（SCE ） 和微核（MN ）实验、中国仓鼠卵巢（CHO ）细胞染色体畸变（CA ）实验等5 种测试系统， 研究何首乌的抗诱变作用。每个实验中，分别设空白对照组、阳性对照组、中药高剂量组、 中药中剂量组以及中药低剂量组。制备出微核及染色体畸变标本后，在光镜下观察、计数。 结果 与阳性（CPP ）组比较，小鼠骨髓细胞MN 实验中，何首乌3 个剂量组有极显著性差 异（P ＜0.01 ）；小鼠骨髓细胞CA 实验中，何首乌3 个剂量组均有极显著差异（P ＜0.01 ）。 与阳性（MMC ）组比较，人体外周血淋巴细胞SCE 实验中，何首乌的3 个剂量组对MMC 诱发的SCE 增高有明显抑制作用（P0.05 或P0.01 ）；人体外周血淋巴细胞MN 实验中， 何首乌3 个剂量组对MMC 诱发的MN 率增高有明显地抑制作用（P0.01 ）。CHO 细胞CA 实验中，何首乌3 个剂量组均能显著降低由MMC 诱发的CHO 染色体畸变率（P0.01 ）。 结论 何首乌无论是体内还是体外实验均表现出抗诱变活性。 关键词：何首乌 抗诱变 微核 染色体畸变 姐妹染色单体交换 中图分类号：R273 何首乌（Polygonum multiflorum Thunb ）为蓼科多年生草本植物何首乌的块根，性苦、 甘、涩，微温，有补益精血和解毒等功效。有主要为大黄酚、大黄素、大黄酸等蒽醌类化 学成分。国内学者研究认为补气药有抗诱变作用[1] ，而补血药研究的较少且方法单一，故 选取何首乌为代表药，采用国际公认的抗诱变物质测试手段：小鼠骨髓嗜多染红细胞微核 （MN ）试验、小鼠骨髓细胞染色体畸变（CA ）试验、人外周血淋巴细胞姐妹染色单体交 换（SCE ）试验、人外周血淋巴细胞微核试验和中国仓鼠卵巢（CHO ）细胞染色体畸变试 验，对何首乌水提物的抗诱变性能进行系统研究。 1 材料与方法 1.1 中药的制备 取生首乌 100 克（生药购于武昌区药材公司，经鉴定合格），用清水、双蒸水各漂洗 3 次后加双蒸水 500ml 浸泡 30 分钟，文火煎煮沸腾后小火加热 30 分钟，取第 1 次药液；再 加 500ml 双蒸水，煎煮方法同上，取第 2 次药液。两次药液混合，滤纸过滤，100℃恒温 水浴加热浓缩。最后得生首乌水提液 200ml （含生药0.5g/ml ），过滤除菌，分装，4 ℃保存 备用。 1.2 主要试剂 注射用环磷酰胺（CPP ），江苏恒瑞医药股份有限公司生产；丝裂霉素C （MMC ），日 本 KYOWA 公司生产；5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-BrdU ），瑞士FLUKA 公司生产。 1.3 实验动物 昆明种小鼠，体重 20～25g ，雌雄各半。由华中科技大学同济医学院实验动物中心提 供。 1.4 实验细胞 人体外周血淋巴细胞，血标本由武汉市中心血站健康献血员（男性，26 岁）提供；中 -1- 国仓鼠卵巢(CHO)细胞系，购自武汉大学中国典型培养物保藏中心。 1.5 小鼠骨髓细胞 MN 及 CA 实验[2、3] 1.5.1 实验分组及处理 中药设高、中、低3 个剂量组，同时设空白对照组、阳性对照组，小鼠随机分到上述 5 组，每组 6 只，雌雄各半。中药组按剂量要求，以不同浓度药液给小鼠连续灌胃 7 天， 空白对照组及阳性对照组灌服等量生理盐水。阳性对照组及中药组于第 7 天灌胃后，腹腔