第十章基因转移技术和基因打靶技术.pptVIP

第十章 基因转移技术和基因打靶技术 （四）电穿孔法 （八）脂质体载体法 应用人工制备的类似细胞膜的膜性结构——脂质体，包装外源基因，再与靶细胞融合，外源DNA导入靶细胞，使其表达。 DNA 细胞融合 转化细胞 PEG 　仙苔病毒 第三节 动物基因打靶技术的基本原理与方法 基因打靶的技术基础： 胚胎干细胞(ES细胞)技术 能在体外培养，保留发育的全能性 同源重组技术 打靶载体 Neo（新霉素）阳性筛选标志 HSV-tk阴性筛选标志：单纯疱疹病毒(herpes simplex virus) 胸腺嘧啶激酶(thymidine kinase) 二、基因打靶 基因敲除的基本程序 打靶载体的构建 打靶载体导入ES细胞：重组置换 基因敲除ES细胞注射入胚泡 胚泡植入假孕小鼠的子宫中 嵌合体的杂交育种 基因打靶在医学中的应用 基因打靶与遗传病 基因打靶与肿瘤的研究 基因打靶与生物制药 基因打靶就是按照预定计划通过外部打靶DNA与内源性靶基因之间的同源重组对胚胎干细胞进行遗传修饰。 * * * * 第一节 概 述 转基因动物(transgenic anim