Genetics8病毒遗传分析.pptVIP

8.1 病毒的形态结构与基因组 8.1.1 病毒的形态结构 病毒由蛋白质外壳和核酸（DNA或RNA）组成。 8.1.2 病毒的基因组 8.3.3 λ噬菌体的基因重组与作图 8.4 噬菌体突变型的互补测验 8.4.1 互补测验与顺反子 互补测验（顺反测验）：根据功能确定等位基因的测验。即根据顺式表现型和反式表现型来确定两个突变体是否属于同一个基因（顺反子） 彼此互补（complementation)：用 rⅡ 突变型成对组合同时去感染大肠杆菌K(λ)株，若被双重感染的细菌中产生两种亲代基因型的子代噬菌体（也有少量重组型的噬菌体），那么就必定是一个突变型补偿了另一个突变型所不具有的功能，这两个突变型就称为彼此互补。 顺反子 互补实验中，两个隐性突变如表现出互补效应，则证明这两个突变型分别属于不同基因；如不能表现出互补，则证明这两个突变型在同一基因内。 对于不同基因间的突变型在互补测验中，不论是顺式还是反式排列均表现出互补效应；但若属于同一基因的不同位点的突变，则顺式结构表现互补，反式结构则不能互补。说明基因是一个独立的功能单位。 8.5 噬菌体T4 rII的缺失突变与作图 8.5.1 缺失作图原理 点突变和缺失突变的区别： 1、点突变是单个位点的突变，缺失突变是多个位点的突变； 2、点突变可回复，而缺失突变不可； 3、点突变之间可发生重组，缺失突变同另一个基因组在这个缺失区的点突变 间不可重组，即无法通过重组而恢复野生型核苷酸顺序。 T4颗粒的装配是循着严格规定的形态发生途径进行的。（P199） 8.4.4 基因内互补 一般情况下同一顺反子内两个突变是不能互补的，但也有一些例外。这种例外发生于同一基因内不同位点突变致使两条原来相同的多肽转变成分别在不同位点上发生变异的多肽，而后将这两条多肽构成双重杂合子，有可能变现出不同程度酶活性部位的恢复，这种现象称为基因内互补，又称等位互补。 缺失作图：Benzer根据这一原理很方便地把数千个独立的rⅡ突变定位在rⅡ遗传图上更小的区段内，此方法称缺失作图。 凡是能和某一缺失突变进行重组的，他的位置一定不在缺失范围内，凡是不能重组的，它的位置一定在缺失范围内。 缺失 1 缺失 2 a b c 细线表示缺失区，二者分别与各种突变体杂交，缺失2只有与a区中突变体杂交才能产生野生型重组体，缺失1只有与 c区突变体杂交才能产生野生型重组体，但2个缺失与b区的突变体杂交均不能产生野生型重组体。 8.5.2 缺失作图方法 （p203） * 李学宝 教授 遗传学 第8章 病毒的遗传分析 噬菌体用作遗传学研究的优点：1）繁殖快；2）群体数量大，易观察到突变等遗传学现象；3）基因组小；4）有各种突变体，可进行重组实验，便于筛选。 DNA病毒 RNA病毒 病毒基因组可分为双链DNA（RNA）或单链DNA（RNA），正链和负链，线状或环状等不同类型。 不同病毒的核酸含量差别较大，通常在1% - 50%。（p185） 8.2.1 噬菌体的繁殖 （1）烈性噬菌体的增殖 T4噬菌体：感染（DNA注入细胞内，基因按顺序表达） 早前期基因表达——晚前期基因表达——晚期基因表达 （p187） 8.2 噬菌体的繁殖与突变型 （2）温和噬菌体的增殖 λ噬菌体（p187） 溶源周期 裂解周期 8.2.2 噬菌体的突变型 （1）条件致死突变型 在一些条件下，突变是致死的，但在另一些条件下仍可以繁殖。 1）“温度敏感”突变（p189） 2）“抑制因子敏感”突变（p189-190） 无义突变与无义抑制基因 无义突变：编码多肽链中的某一氨基酸密码子突变为终止密码，使多肽链提前合成终止而变短。 无义抑制基因：tRNA基因的反密码子的一个突变，使tRNA的反密码子能够识别无义密码，并插入一个氨基酸而防止终止。（p190） 例如，su3+ 菌株tRNATyr基因突变，使反密码子由GUA变为CUA，识别琥珀型终止密码子UAG，插入酪氨酸而防止终止。 (2) 噬菌体形态和宿主范围的突变型 噬菌体形态突变型 宿主范围的突变型（p190-191） 8.3.1 Benzer的重组测验与基因的精细结构分析 两种rⅡ突变类型：rx、ry　 　　　　r+rx　　×　　ryr+　　　　　　　　　 ↓混合感染　　　　　　　　E.coli B株　　　　　　　　　接种　　　　　　　　　　　　　　　B株　　　　　K(λ)株　　　　　　　 计数　　　　　r+ry、rxr+