DNA突变及修复系统（DNA　Mutation and repair）.pptVIP

外显子转变（exon skipping） 错义突变(Missense mutations): 改变了一个氨基酸，从一个AA变成另一个AA。 无义突变(Nonsense mutation):也称终止突变。一个AA密码子变成终止密码子，导致肽链合成提前终止，产生残缺蛋白 移码突变(Frameshift mutation): 突变后改变了AA翻译的读码框，产生了移码。移码也能产生一个提前的终止密码子 抑制子突变(Suppressor mutations): 第二个突变位点使第一个突变位点无效 不对等交换(Unequal crossing-over) 转座(Transposition) 化学诱变(Chemical mutagens) (a) 碱基替换: 与DNA碱基结构几乎相同的碱基类似化学物，如5-溴尿嘧啶对正常胸腺嘧啶T有着相同的结构，在正常状态下可与A配对，但偶尔会和G配对，产生突变。 由于染色体DNA在生命过程中占有至高无上的地位，DNA复制的准确性以及DNA日常保养中的损伤修复就有着特别重要的意义。 错配修复（mismatch repair） 错配修复对DNA复制忠实性有重要意义，DNA子链中的错配几乎完全能被修正。 体外复制的突变率大约为 10-6 生物体内有校对功能的酶系统及修复系统，可降低复制的突变率，突变率大约在10-9 碱基切除修复（Base-excision repair） 所有细胞中都带有能识别受损核酸位点的不同的糖苷水解酶，能特异性切除受损核苷酸上的N-β糖苷键，形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为AP位点。 核苷酸切除修复（nucleotide-excision repair） 当DNA链上相应位置的核苷酸发生损伤，导致双链之间无法形成氢键，则由核苷酸切除修复系统负责修复 切除修复(也称暗修复) ：直接切除含有TT二聚体的DNA片段 ，然后用新的核苷酸链进行修补 DNA的直接修复（direct repair） 生物体内还存在DNA损伤直接修复而并不需要切除碱基或核苷酸的机制。DNA光解酶（photolyase）能把在光下或经紫外光照射形成的环丁烷胸腺嘧啶二体及6-4光化物（6-4-photoproduct）还原成为单体。 Ac/Ds (Activator/Dissociation)结构 转座子的转座特点－靶位点的序列重复 转座子的转座特点－回复突变体中留下足迹 转座作用的遗传学效应 转座引起插入突变，导致结构基因失活。 转座产生新的基因。 转座产生的染色体畸变。 转座引起生物进化。由于转座作用，使某些原来在染色体上相距甚远的基因组合到一起，构建成新的表达单元，产生新的基因和蛋白质分子。 转座子产生突变的原理 转座子应用－产生突变的重要来源 转座子的应用－构建插入突变体库 转座子的应用－基因克隆 限制性内切酶及载体 限制性内切酶(Restriction enzymes )：可以精确的将DNA切断的蛋白质。如BamHI: GGATCC, Hind III: AAGCTT, SmaI: CCCGGG 载体(Vectors)：可用来增殖及携带外源DNA片段的质粒 一个载体含有的基本要素 要有一个复制子 要有一选择标记 要有多克隆位点 大肠杆菌中DNA的修复系统 a.发现碱基错配。 b. 在水解ATP的作用下，MutS, MutL与碱基错配位点的DNA双链相结合。 c. MutS-MutL在DNA双链上移动，发现甲基化DNA后由MutH切开非甲基化的子链。 母链的识别依据来自Dam甲基化酶，它能使位于5’GATC序列中腺苷酸的N6位甲基化。一旦复制叉通过复制起始位点，母链就会在开始DNA合成前的几秒种至几分钟内被甲基化。 错配修复系统根据“保存母链，修正子链”的原则，找出错误碱基所在的DNA链，并在对应于母链甲基化腺苷酸上游鸟苷酸的5’位置切开子链。当错配碱基位于切口3’下游端时，在DNA外切酶VII作用下切除单链DNA直到错配位点，并在PolIII和SSB的作用下合成新的子链片段。 若错配碱基位于切口的5’上游端，则在DNA外切酶I或X的作用下切除单链DNA直到错配位点，再合成新的子链片段。 碱基切除修复示意图 i）糖基酶识别错配位点，并制造AP位点。 ii）AP内切酶切除戊糖。 iii）DNA 聚合酶修补缺口。 iv）DNA 连接酶连接缺口。 DNA糖基酶：识别DNA链上的错配碱基，并切除碱基，产生一个AP位点。 AP内切酶：识别DNA单链上的AP位点，并能在此处切断DNA单链。 光修复：在可见光条件下，DNA光解酶被激活，直接切断T-T二聚体之间的交联键。 突变的种类 突变造成的后果 引起突变的因素 突变的检出及分析 DNA修复系统 转座子 　转座子的概念 　转座子类型 　转座子的结构 　转座子的特点