第3章核酸的结构与功能20110831.pptVIP

科学出版社案例式教材《生物化学》课件 核酸的分类 DNA RNA 嘌呤 M7G N6，N6-2m6A N6-m6A N6-m6A M7G 嘧啶 m5C DHU hm5C T 重要的核苷酸衍生物 含核苷酸的生物活性物质： NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP 定义：核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。 核心颗粒 核小体 连接区 核心颗粒：由长146bp的双螺旋DNA以超螺旋方式缠绕组蛋白八聚体1.8圈组成。 连接区：由连接区 DNA 和组蛋白H1组成 连接区DNA：连接相邻两个核心颗粒 组 蛋 白（histone) 组蛋白种类： H1、H2A、H2B、H3、H4 组蛋白八聚体（核心组蛋白）：由各二分子H2A、H2B、H3、 H4 组成八聚体 H1 ：位于连接区 1. tRNA分子含有较多的稀有碱基 含 10-20% 稀有碱基，如 DHU 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 稀有碱基 解链曲线： 如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260（absorbance， A，A260代表溶液在260nm处的吸光率）值作图，所得的曲线称为解链曲线。 第5节 核酸的分离与纯化 Isolation and Purification of Nucleic Acid 一、核酸分离与纯化的一般原则 采用温和的条件 防止过酸、过碱、 避免剧烈搅拌等 抑制核酸酶的活性 防止核酸分子被降解和变性 二、核酸的分离与纯化 酚抽提法 超速离心法 凝胶电泳法 层析法分离法 三、核酸含量测定与纯度鉴定 四、核酸序列分析（DNA自动测序） DNA的酶法测序 DNA的化学法测序 DNA序列分析已经实现自动化 Structure and Function of RNA 第三节 RNA的结构与功能 RNA的种类、分布、功能 * mRNA结构特点 1. 大多数真核mRNA的5′末端均在转录后加上一个7-甲基鸟苷，同时第一个核苷酸的C′2也是甲基化，形成帽子结构：m7GpppNm-。 2. 大多数真核mRNA的3′末端有一个多聚腺苷酸(polyA)结构，称为多聚A尾。 一 、信使RNA的结构与功能 真核生物mRNA的帽子结构 5＇ 5＇ mRNA核内向胞质的转位 mRNA的稳定性维系 翻译起始的调控 帽子结构和多聚A尾的功能 转录核内DNA遗传信息的碱基排列顺序，并携带至细胞质，指导蛋白质合成中的氨基酸排列顺序。 DNA mRNA 蛋白 转录 翻译 原核细胞 细胞质 细胞核 DNA 内含子 外显子 转录 转录后剪接 转运 mRNA hnRNA 翻译 蛋白 真核细胞 mRNA的功能 二、转运RNA的结构与功能 2. tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 DHU环 反密码环 额外环 TΨC环 额外环 氨基酸臂 DHU环 反密码环 环 TΨC环 反密码子 5＇ 3. tRNA的三级结构—— 倒L形 * tRNA的功能 搬运氨基酸到核糖体和识别密码子，参与蛋白质的翻译。 * rRNA的结构 三、核蛋白体RNA的结构与功能 * rRNA的功能 参与组成核蛋白体，作为蛋白质生物合成的场所。 * rRNA的种类（根据沉降系数） 真核生物 5S rRNA 28S rRNA 5.8S rRNA 18S rRNA 原核生物 5S rRNA 23S rRNA 16S rRNA 核蛋白体的组成 占总重量的35% 49种 占总重量的30% 36种 蛋白质 4718个核苷酸 160个核苷酸 120个核苷酸 28S 5.8S 5S 2940个核苷酸 120个核苷酸 23S 5S rRNA 60S 50S 大亚基 占总重量的50% 33种 占总重量的40% 21种 蛋白质 1874个核苷酸 18S 1542个核苷酸 16S rRNA 40S 30S 小亚基 真核生物 （以小鼠肝为例） 原核生物 （以大肠杆菌为例） 其他小分子RNA及RNA组学 除了上述三种RNA外，细胞的不同部位存在的许多其他种类的小分子RNA，统称为非mRNA小R