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第六章 生长繁殖及其控制(修改)
第六章 微生物的生长 1. 比浊法 1. 计数板直接计数法 影响延迟期长段的因素 1.接种龄 2. 接种量 3。培养基的成分 ①细胞快速分裂,生长速率常数R最大,细胞每分裂一次所 需世代时间(简称代时,又称增代时间)最短而稳定; ②菌体平衡生长,其个体形态、细胞化学组成和生理特征比 较均匀一致; ③酶活力高而稳定,代谢旺盛。 对各种微生物的代谢过程产生影响,改变其生长速率。 温度对微生物生长的影响具体表现在: ①影响酶的活性。 ②影响细胞膜的流动性。 ③影响物质的溶解度。 ④影响机体生物大分子的活性。 (1)微生物生长活动的温度类群 (1)微生物生长活动的温度类群 (1)微生物生长活动的温度类群 (1)微生物生长活动的温度类群 (2)微生物生长速率和温度的关系 二、氧气 根据微生物的呼吸作用不同,所含的呼吸酶系统是否完全,作为最终电子受体的物质是否是氧,以及微生物与分子氧的关系不同, 分成好氧菌、厌氧菌、兼性厌氧菌、微好氧菌和专性好氧菌五种呼吸类型。 (1)耐氧菌(aerotolerant anaerobe) 有氧条件下进行厌氧生活,生长不需要氧, 分子氧对它们无毒; 它们没有呼吸链, 细胞内有超氧化物歧化酶(SOD,superoxide dismutase)和过氧化物酶, 但无过氧化氢酶;靠专性发酵获得能量。 乳酸菌多数是耐氧菌。例如乳酸乳球菌乳酸亚种、粪肠球菌、乳酸乳杆菌以及肠膜明串珠菌等; (2) 厌氧菌(anaerobe) 有一般厌氧菌和专性厌氧菌之分。此类菌只能在无氧或低氧化还原电位的环境下生长,分子氧对它们有毒,即使短期接触空气,也会抑制其生长甚至死亡; 它们缺乏完整的呼吸酶系统,缺乏SOD和细胞色素氧化酶,多数还缺乏过氧化氢酶;靠发酵、无氧呼吸、循环光合磷酸化或甲烷发酵等提供所需能量。 常见的厌氧菌有梭菌属 、拟杆菌属、双歧杆菌属、消化球菌属、瘤胃球菌属、韦荣氏球菌属、脱硫弧菌属、甲烷杆菌属等。其中多数产甲烷细菌是极端厌氧菌。 (3) 兼性厌氧微生物(facultative aerobe) 此类菌在有氧或无氧条件下均能生长,但有 氧情 况下生长得更好;它们具有需氧菌和厌氧菌的两套呼吸酶系统,细胞含SOD和过氧化氢酶;有氧时靠有氧呼吸产能,无氧时籍发酵产能。?许多酵母菌、肠道细菌、硝酸盐还原菌(如脱氮小球菌),人和动物的病原菌均属此类菌。肠杆菌科的各种细菌包括大肠杆菌、产气肠杆菌和普通变形杆菌(Proteus vulgaris)等都是常见的兼性厌氧菌。 (4)微好氧微生物(microaerophilic bacteria) 此类菌在有氧和绝对厌氧条件均不能生长,只能在较低的氧分压下才能正常生长;?它们具有完整的呼吸酶系统,通过呼吸链并以氧为最终氢受体,在(1~3)×103Pa大气压下进行呼吸产能。例如霍乱弧菌、发酵单胞菌属、氢单胞菌、以及少数拟杆菌属的种等属于此类菌。在摇瓶培养时,菌体生长于液面以下数毫米处。 ? (5) 专性好氧菌(strict aerobe) 必须在有分子氧存在的条件下才能生长; 它们具有完整的呼吸酶系统, 细胞含 SOD和过氧化氢酶, 通过呼吸链并以分子氧作为最终氢受体,在正常大气压(2×104Pa)下进行好氧呼吸产能。多数细菌、放线菌、真菌属于此类菌。 一般实验室和工业生产上常用摇瓶振荡或通气搅拌供给充足的氧气。?? 厌氧菌的氧毒害机制?1971 在McCord 和Fridovich提出SOD的学说:?他们认为,厌氧菌因缺乏SOD,故易被生物体内产生的超氧阴离子自由基而毒害致死;? 好氧菌因为细胞有SOD,剧毒的?O2- 就被歧化成毒性稍低的H2O2,而后被过氧化氢酶分解为无毒的H2O。?厌氧菌因为不能合成SOD,又无H2O2酶,故无法使?O2-歧化成H2O2而被?O2-毒害致死。在有氧存在时形成的?O2-就使其自身受到毒害。 多数耐氧菌都能合成SOD,且有过氧化物酶,故剧毒的?O2-可先歧化成有毒的H2O2,然后被过氧化物酶还原成无毒的H2O。即: 过氧化氢酶 对于兼性厌氧的E.coli,如果使之发生缺乏SOD的突变,它即成为“严格厌氧菌”,即E.coli短期接触氧被毒害致死.? SOD能清除生物体内的?O2-而受到医药界的极大关注。 外源SOD具有保护DNA、蛋白质和细胞膜的作用,使它们免遭?O2-的破坏。
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