第一章-dna与染色体-2014-2-26.ppt

第一章 DNA与染色体 徐秀容 本章主要内容 DNA的结构 DNA的复制 DNA的损伤修复 DNA转座 染色体 1. DNA的结构 DNA的一级结构 DNA的二级结构 DNA的三级结构 DNA的高级结构 1.1 DNA的一级结构 1）概念：DNA的一级结构是指DNA分子的四种核苷酸的数量、连接顺序,显示DNA分子的化学组成。 6）DNA分子碱基组成的Chargaff法则 (1) DNA的碱基组成具有种属特异性； (2) DNA的碱基组成无组织和器官特异性,组成稳定； (3) 碱基配对遵循当量规律：所有双链DNA分子中，A＝T，G＝C（摩尔数相等），A＋G＝T＋C。 1.2 DNA的二级结构（Secondary strucure 1） DNA双螺旋结构模型的提出 1953年，J. Watson和F. Crick 提出 获1962年诺贝尔生理医学奖 DNA双螺旋结构模型的提出的科学依据 a、 1938年 W. T. Astbury 首次用X-射线分析DNA高级结构；1952 年M.H.F.Wilkins Rosalind Franklin得到了高度定向的DNA纤维的X-射线照片。 b、 1950年Chargaff 发现DNA分子中当量规律：所有双链DNA分子中，A＝T，G＝C（摩尔数相等）， A + G = T + C； c、 1952年 Alexander Todd 发现了核苷酸和核苷酸之间由磷酸二酯键连接； （5)碱基平面与纵轴垂直，糖环平面与纵轴平行 (6) 影响双螺旋稳定的因素：碱基堆积力、氢键、疏水相互作用和静电排斥力 。 碱基堆积力(base-stacking interactions)是指在DNA双螺旋结构中，相邻疏水性碱基在旋进中彼此堆积在一起相互吸引形成的作用力 （7） DNA分子二级结构的其他构象 目前已经发现的有A型、Z型等 A型： 右手双螺旋 每圈有11个碱基对，螺距2.6nm 脱水作用时更倾向于A型 RNA-RNA、RNA-DNA（转录）易形成A型 Z-DNA Rich等研究dCGCGCG六聚体时发现 六聚体的磷酸基在多核苷酸骨架上呈Z字型分布 左手螺旋，每圈12个碱基对，螺距3.7nm 。 在生理状态下存在， 只发现于修饰的嘌呤和嘧啶碱基序列中。 （2）远离调控（转录区可在上千个碱基对外） 调控区 B-DNA 不转录 调控区 Z-DNA 可能转录 1.3 DNA的高级结构 DNA的高级结构：DNA螺旋双链进一步扭曲盘旋形成的高级空间结构。 1） 超螺旋（Supercoil )是高级结构的主要形式 负超螺旋－－盘旋方向与DNA双螺旋方向相反 正超螺旋－－盘旋方向与DNA双螺旋方向相同 2）末端固定的线性DNA分子或双链环状DNA分子容易形成超螺旋 细菌DNA，某些病毒DNA，某些噬菌体DNA，质粒DNA，线粒体DNA、叶绿体DNA 2.DNA的复制 概述 原核生物DNA的复制 真核生物DNA的复制 DNA复制的其他方式 复制的调控 2.1 概述 1）概念 DNA 复制：以一个亲代DNA分子为模板合成两个子代DNA分子的过程。 整个基因组的复制 2）真核生物核基因组及原核生物基因组复制的基本原则 （1） 半保留复制 DNA在复制过程中，每条链分别作为模板合成新链，产生互补的两条链。因此，以母链为模板合成的子代DNA分子，其一条链是来自亲代的DNA链，另一条链是新合成的链。这种复制方式被称为DNA的半保留复制。 模板：指导互补链(或肽链）合成的DNA或RNA序列 Meselson- Stahl实验 ：研究了经15N标记3个世代的大肠杆菌DNA,首次证明了DNA的半保留复制。 （2） 基因组DNA的复制从固定的起始点(origin)以双向等速复制方式进行的双向复制。 复制叉：DNA复制时，双链DNA要解开成两股链分别进行，所以，复制位点呈Y形叉子形式，被称为复制叉(Replication fork)。 （3）半不连续复制 在复制叉处，以亲代DNA分子的3′→5′链为模板的新链以5′→3′方向连续合成，此链称为前导链(1eading strand)。 在复制叉处以5′→3′链为模板的新链合成方向与模板的解链方向相反，该链的合成以不连续方式一段一段合成，这些短片段称为岗崎片段。这条新合成的链为滞后链 (1agging strand)。 DNA聚合酶催化的新链的合成方向都是5’→3’ 用3H脱氧胸苷短时间标记后提取DNA，得到不少平均长度为2-3kb