第9章真核生物基因表达调控2.ppt

第九章 真核生物基因的表达调控 第四节转录水平上的调控 真核生物的调控也主要发生在转录水平上，受大量特定的顺式作用元件（cis-acting element）和反式作用因子（trans-acting factor）的调控，大多数真核生物的转录调控是通过两者的相互作用来实现的。 （一） 顺式作用元件 真核生物DNA序列（非编码序列）和被转录的结构基因距离较近，和转录调控有关。 A 启动子（启动子上游近侧序列） B 增强子 C 沉默子 A 启动子（promoter） 包括核心启动子和上游启动子，在转录起始点上游约100－200bp以内，每个元件长度约为7－20bp，决定RNA聚合酶Ⅱ转录起始点和转录频率的关键元件。 a 核心启动子（core promoter） 保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必须，包括转录起始位点和TATA盒。 核心启动子单独起作用时，只能确定转录起始位点并产生基础水平的转录。 b 上游启动子元件（upstream promoter element，UPE） 包括CAAT盒和GC盒等，能通过TFⅡD复合物调节转录起始的频率，提高转录效率。 B 增强子(enhancer) 能使和它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列，顺式作用元件（DNA序列）。 没有增强子 启动子不表现活性 没有启动子 增强子无法发挥作用 特点： 增强效应十分明显；不受序列方向和距离的制约；有细胞和组织特异性；大多为重复序列；无基因特异性；许多增强子还受外部信号的调控。 C 沉默子(silencer) 负性调节元件，与相应的反式因子结合后，可以使正调控系统失去作用，阻遏基因转录。 这类特定序列不受距离和方向的限制，但机理目前尚不清楚。 （二）反式作用因子 能直接或间接识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 真核生物的RNA聚合酶不能识别DNA上的结合位点，识别这些序列的是调节转录的反式作用因子，即转录因子。 但有些转录因子是识别并结合其它转录因子以形成转录装置的必需蛋白。 ◆ 和反应性元件（response elements）相结合的反式作用因子 反应性元件如热休克反应元件（heat shock response element，HSE），糖皮质激素反应元件（glucocorticoid response element，GRE），金属反应元件（metal response element，MRE），肿瘤诱导剂反应元件（tumorgenic agent response element，TRE），血清反应元件（serum response element，SRE）。 B 反式作用因子结构 反式作用因子通过以下不同的途经发挥调控作用： ① 蛋白质和DNA相互作用； ② 蛋白质和配体结合； ③ 蛋白质之间的相互作用以及蛋白质的修饰 正调控与负调控 C 反式作用因子DNA 结合域结构模式 不同蛋白质的锌指数不同，如两栖类5SrDNA转录因子TFA有9个锌指。结构也有些差异。 一段肽链中每隔7个AA 即有一个Leu α螺旋 亲水面：亲水AA组成 疏水面：Leu组成 （亮氨酸拉链条） 可形成二聚体（发挥作用） （同二聚体/异二聚体） DNA的结合域： 拉链区以外结构 分为两类： A类：广泛表达的蛋白。如哺乳动物的E12／E47（和免疫球蛋白基因增强子结合）； B类：组织特异性表达的蛋白。如哺乳动物的MyoD（肌浆蛋白基因的转录因子），果蝇的AC－S（无刚毛基因的产物）。 一种转录调控蛋白。 D 转录活化结构域 一般由20-100个氨基酸残基组成。如GAL4分子中有2个这种结构域，分别位于多肽链的第147-196位和第768-881位；GCN4的转录激活结构域位于多肽链的第106-125位。 a. 酸性α-螺旋(acidic α-helix) 该结构域含有由酸