第8章真核基因表达调控下.ppt

第八章 真核基因表达调控（下） 真核生物基因表达调控的特点 真核生物DNA水平上的基因表达调控 真核生物转录水平上的基因表达调控 蛋白质磷酸化对基因转录的调控 其他水平上的表达调控 原核生物 环境+养料 生长繁殖 通过转录调控，开启或关闭基因表达。 真核生物基因表达调控的特点 1、多层次 2、个体发育复杂 3、活性染色体结构变化：对核酸酶敏感 、DNA拓扑 结构变化 、DNA碱基修饰变化 、组蛋白变化 4、正性调节占主导 5、转录与翻译间隔进行 6、转录后修饰、加工 研究基因调控主要回答的问题 1.什么是诱发基因转录的信号？ 2.基因调控主要是在哪一步实现的（转录或蛋白质合成）？ 3.不同水平基因调控的分子机制是什么? 真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在以下几个方面的差异: ① 在真核细胞中，一条成熟的mRNA链只能翻译出一条多肽链，很少存在原核生物中常见的多基因操纵子形式。 ③ 高等真核细胞DNA中很大部分是不转录的，大部分真核细胞的基因中间还存在不被翻译的内含子。 ⑤ 在真核生物中，基因转录的调节区相对较大，它们可能远离启动子达几百个甚至上千个碱基对，这些调节区一般通过改变整个所控制基因5’上游区DNA构型来影响它与RNA聚合酶的结合能力。 在原核生物中，转录的调节区都很小，大都位于启动子上游不远处，调控蛋白结合到调节位点上可直接促进或抑制RNA聚合酶与它的结合。 ⑥ 真核生物的RNA在细胞核中合成，只有经转运穿过核膜，到达细胞质后，才能被翻译成蛋白质，原核生物中不存在这样严格的空间间隔。 血红蛋白是所有动物体内输送分子氧的主要载体，由2α2β组成的四聚体加上一个血红素。 　 所有动物血红蛋白基因的基本结构相同，但在个体发育不同时期却出现不同形式的亚基。人类发育阶段中血红蛋白组成的变化。 外显子与内含子的连接区 指外显子和内含子的交界或称边界序列，它有两个重要特征： 内含子的两端序列之间没有广泛的同源性 连接区序列很短，高度保守，是RNA剪接的信号序列 5GT AG 3 2、外显子与内含子的可变调控 组成型剪接：一个基因的转录产物通过剪接只能产生一种成熟的mRNA。 选择性剪接：同一基因的转录产物由于不同的剪接方式形成不同mRNA。 8.1.3 真核生物DNA水平上的基因表达调控 定义：将一个基因从远离启动子的地方移到距它很近的位点从而启动转录的方式。 e.g. 通过基因重排调节基因活性的典型例子是免疫球蛋白结构基因的表达。 V、C、J区在胚胎期细胞中相距较远，细胞发育分化时，免疫球蛋白重链基因DNA重排。 免疫球蛋白重链基因片段重排 在真核生物中，5-甲基胞嘧啶主要出现在CpG序列、CpXpG、CCA/TGG和GATC中 真核生物细胞内存在两种甲基化酶活性： 2、DNA甲基化抑制基因转录的机理 活性染色质由于核小体构型发生构象的改变，具有疏松的染色质结构便于转录调控因子与顺式调控元件结合和RNA聚合酶在转录模板上滑动。 8.2 真核基因转录机器的主要组成 8.2.1 真核基因的转录 顺式作用元件：影响自身基因表达活性的非编码DNA序列。 例： 启动子、增强子、沉默子等 8.2.2 增强子： 能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。 增强子特点： ① 增强效应十分明显，一般能使基因转录频率 增加10-200倍； ③ 大多为重复序列，一般长约50 bp，适合与某些蛋白因子结合。其内部常含有一个核心序列：（G）TGGA/TA/TA/T（G），该序列是产生增强效应时所必需的； 增强子作用机理： 沉默子： 某些基因含有负性调节元件——沉默子，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。 8.2.3 反式作用因子 定义： 能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 结 构 （1）DNA结合结构域： 螺旋-转折-螺旋（Helix-turn-helix，H-T-H） 锌指结构（zinc finger） 碱性-亮氨酸拉链（basic - leucine zipper） 碱性-螺旋-环-螺旋（basic – helix /loop /helix，bHLH） 2、锌指结构 3、碱性-亮氨酸拉链 定义：