静电纺丝纳米纤维体外释放与蛋白活性的研究InVitroReleaseand.PDF

3809 现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine Vol.12 NO.20 JUL.2012 · · 静电纺丝纳米纤维体外释放与蛋白活性的研究* 魏蓓蓓 刘一浓 秦明杰 许观萍 吴 飞△ (上海交通大学药学院上海200240) 摘要目的：通过选择不同的模型蛋白，探讨准确的研究静电纺丝纳米纤维支架的体外释放和快速的测定蛋白活性的方法。 方 法：通过O/W 乳液法静电纺丝制备纳米纤维，并用扫描电镜对纳米纤维表面进行了表征。以GM-CSF 为模型蛋白，采用ELISA 双抗体夹心法考察纤维的体外释放行为；以BSA 为模型蛋白，用SEC-HPLC 比较纤维制备前后蛋白的聚集情况；以β- 半乳糖苷 酶为模型蛋白，用ONPG 法比较纤维制备前后酶的催化活性。 结果：纤维表面平滑，直径均一，呈现互相连通的三维网状结构。纤 5 90% BSA 66.53% - 3.37% 维在 天内释放 以上；纤维中回收的 单体比例为 ；β 半乳糖苷酶在纤维中的催化活性保持原活性的 。结 论：通过选择不同的模型蛋白，能够准确的测定静电纺丝纤维的体外释放，快速的考察纤维中的蛋白活性，对于更好的研究蛋白 药物纳米纤维支架具有重要的参考价值。 关键词：纳米纤维；体外释放；蛋白活性 R318 R945 A 1673-6273 2012 20-3809-03 中图分类号： ， 文献标识码： 文章编号： （ ） In Vitro Release and Protein Bioactivity Study of Electrospun Nanofibers* WEI Bei-bei, LIU Yi-nong, QIN Ming -j ie, XU Guan -p ing, WU Fei△ (School of Pharmacy, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai, 200240 China) ， ABSTRACT Obj ective: To investigate the method of detecting the in vitro release and protein bioactivity of electrospun nanofibers with different model proteins. Methods: Nanofibers were prepared by W/O emulsion electrospinning. ELISA method was used to investi- gate the in vitro release of nanofibers with GM-CSF as model protein. SEC-HPLC was used to test the protein aggregates with BSA as model protein. ONPG method was used to test protein bioactivity with β-galactosidase as model protein. Results : The nanofibers were smooth and uniform. GM-CSF can be released