鸡γ-干扰素基因重组质粒在工程菌株中的稳定性研究.PDF

微生物学通报 JUL 20, 2008, 35(7): 1055~1058 Microbiology © 2008 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 鸡 γ-干扰素基因重组质粒在工程菌株中的 稳定性研究 王宏华1 凌红丽1* 侯竹美2 梁晶晶2 马向东1 王 雷1 李志中1 孙海新1 赵玉惠1 (1. 266111) (2. 266109) 摘 要: 本文通过传代的方法研究了鸡γ-干扰素基因的重组质粒pET-ChIFN-γ在工程菌CH1 中的 遗传稳定性。结果表明重组质粒在没有筛选压力下存在质粒不稳定性, 100 代时质粒稳定性只有 69 。适当的筛选压力可以显著降低质粒的遗传不稳定性, 100 代时稳定性提高到95 。各代重组 菌株在生长性能、质粒酶切图谱、蛋白表达等方面均保持一致, 未见明显差异。生物活性检测原 代和 100 代均达到 1.0×105 IU/mL 以上。以上结果表明重组质粒pET-ChIFN-γ在工程菌株CH1 中具 有良好的遗传稳定性, 其质粒遗传不稳定性可由适当的筛选压力来控制。 关键词: 鸡γ-干扰素, 遗传稳定性, 质粒稳定性, 传代 Study on the Heredity Stability of a Recombinant Plasmid pET-ChIFN-γ in Escherichia coli WANG Hong-Hua1 LING Hong-Li1* HOU Zhu-Mei2 LIANG Jing-Jing2 MA Xiang-Dong1 WANG Lei1 LI Zhi-Zhong1 SUN Hai-Xin1 ZHAO Yu-Hui1 (1. Qingdao Continent Co. Ltd., Qingdao 266111) (2. Aquaculture College , Qingdao Agricultural University, Qingdao 266109) Abstract: A novel recombinant Escherichia coli BL21(DE3)/pET-ChIFN-γ was successfully constructed for high expression of chicken interferon-γ(ChIFN-γ), and the heredity stability of pET-ChIFN-γ was mainly focused on. It was segregationally unstable of the plasmid under no kanamycin selection pressure, only 69% cells containing plasmid after 100 generations. But it could be controlled by the supplementation of kanamy- cin pressure. The growth