开题报告-胡蕾-广东医学院.ppt

PI3K/AKT信号传导通路对鼻咽癌转移的影响 广东医学院病理教研室 导师： 姜汉国 副教授 研究生: 胡蕾 一、 研究意义及国内外研究现状 多发生于广东珠江三角洲地区及广西等地。 患者常在颈部淋巴结发生转移后，因颈部肿物才来就诊，已属晚期。 约有40％－60％的鼻咽癌患者死于鼻咽癌复发或远处转移，研究其转移的机制成为治疗鼻咽癌防止其恶性进展的一个重要方面。 恶性肿瘤的转移机理研究 早期即有“种子土壤学说” 后来人们又发现肿瘤的转移与血管有关，血管生成的增强和肿瘤转移能力成正相关 现今细胞信号传导通路对转移的影响也成为近几年一大研究热点 PI3K的结构简介 PI3K主要由一个催化亚基P110和一个调节亚基P85组成。P85的N端含有一个SH3区和一个能与其他蛋白质的SH3区结合的富含脯氨酸序列，其C端含有两个SH2区和一个位于两个SH2区之间可结合P110的结构区。P110可催化自身和其他蛋白磷酸化。 AKT结构简介 为癌基因akt的产物。其有三种亚型AKT1.AKT2.AKT3。三者都含有一个N端PH域，一个激酶催化域和一个C端调节域。 PI3K/AKT通路的激活 首先 生长因子 癌基因 －PI3K活化－磷酸 化PIP2－生成PIP3 其次 PIP3与AKT结合－AKT构相改变 同时 PIP3与PDK结合 AKT与PDK靠近 AKT促进细胞侵袭和转移的机制 1 、AKT磷酸化eNOS的Ser1177、1179（牛，人），使之活化,eNOS活化导致NO产生，NO直接的上调ICAM的表达有关。 2、 经过AKT/mTOR/P70S6K途径,P70s6k的活化促进肌动蛋白的细丝重构，促进细胞的运动。 AKT促进血管生成的可能机制 1，AKT磷酸化eNOS，使之活化，而eNOS与肿瘤生成有密切关系。 2，AKT通过多种途径上调HIF－1α ，HIF－1 α促进VEGF的表达。 二、创新之处  以往大量报道PI3K/AKT在乳腺癌，肺癌，大肠癌，等癌中的异常表达且在食管癌转移中的表达明显高于非转移食管癌，但鼻咽癌中该通路的研究尚未见报道。 四、研究目标 研究内容 拟解决关键问题 研究目标：文献报道许多癌组织中过表达PI3K/AKT,本实验试图证实已发生转移鼻咽癌中该通路表达增加，阻断该通路后与转移有关的各蛋白因子水平下调，从而证实该通路激活过表达促进癌细胞转移。 五．拟采取研究方法 1 鼻咽癌细胞CNE－2Z及CNE－2Z－H5－9的复苏培养。 2 免疫组化检测鼻咽癌与有淋巴结转移鼻咽癌组织p－AKT，PI3K，P70S6K的表达情况。 ??? 七、可行性分析 鼻咽癌标本和发生淋巴结转移的鼻咽癌标本可从附院获取。 ? CNE－2Z和CNE－2Z－H5－9细胞本实验室有冻存。 ? 所需各种试剂均有出售 八．预期结果 金费预算 和进度安排 1．?有淋巴结转移的鼻咽癌组织中PI3K，P70S6K，pAKT各项指标表达均高于无淋巴结转移的鼻咽癌。 2 通路阻滞剂的加入后CNE－2Z－H5-9的细胞运动能力下降。 * PI3K/AKT（磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸苏氨酸激酶）信号传导通路的异常改变常出现于人类一些恶性肿瘤组织中，与肿瘤的进展密切相关，以往多有报道PI3K/AKT过度表达常发生于卵巢癌，宫颈癌，乳腺癌，等中。而鼻咽癌及高转移鼻咽癌中通路的异常表达未见报道 最后 在PDK1的直接或间接催化下 催化AKT结构域的THR308位点 再在LK即整合素连接激酶的 作用 下催化羧基端尾区的SER473位点 也发生磷酸化 最终 AKT充分活化 生长因子，癌基因 PI3K激活 PIP2磷酸化生成PIP3 PIP3与PDK结合 PIP3与AKT结合 AKT与PDK靠近PDK磷酸化AKT AKT THR308位点磷酸化 AKT SER473位点磷酸化 AKT活化 LK磷酸化AKT 活化的AKT BAD磷酸化 凋亡受抑 活化核转录因子 c－myc表达 Bcl-2表达 细胞存活生长 该