FADDDEL和WEE1HU-GFP 的构建、表达及其保护靶细胞的体内外实验研究.ppt

移植免疫 —相关免疫学基础理论问题的探讨— 华中科技大学同济医学院 免疫学系 龚非力 2009.07 一、同种抗原的识别机制 二、固有免疫相关的移植排斥反应 三、移植物慢性失功的危险因素 一、同种抗原的识别机制 ——TCR“特异性”识别p-MHC复合结构 T细胞（能否？如何？）识别同种抗原? ——理论上的困惑 1.T细胞“跨越”MHC限制性识别同种抗原 ——与经典的“MHC限制性”理论相悖 2.直接识别与间接识别 ——(受者）同种特异性T细胞可直接识别供者APC所提呈的任何（外源/自身）肽-（供者）同种MHC分子复合物 3.高频淋巴细胞克隆参与同种移植排斥反应 ——受者淋巴细胞库（repertoire)中10%～20%的T细胞对同种抗原产生应答 4.“特异性”TCR对同种抗原的交叉识别 ——受者体内记忆性淋巴细胞参与对（供者）同种抗原的识别 TCR的MHC限制性识别 同种抗原反应性TCR与普通抗原反应性T细胞均识别特异性pMHC复合结构 * 对任一个体，任何肽段凡能与同种MHC分子结合，即被该个体T细胞视为“外来抗原”； * 普通抗原被TCR识别的表位仅为外来肽段/自身MHC复合物；同种抗原被TCR识别的表位为任何(外来/自身）肽段/同种MHC复合物，其特异性数量极多。 * 所谓“同种反应性T细胞”，乃针对不同抗原肽/同种MHC复合物的多克隆T细胞混合物。 二、固有免疫相关的移植排斥反应 （一）适应性免疫和固有免疫概述 外源性危险信号 主要指病原体携带（或产生）的PAMP。 内源性危险信号 指机体自身细胞所释放的内源性分子，即损伤相关的分子模式（damage assciated molecular pattern，DAMP） 危险相关分子模式 （danger-associated molecular pattern，DAMP） 外源性危险信号 即PAMP，如LPS、非甲基化CpG DNA、dsDNA等。 内源性危险信号（警报素alarmin） * 炎症和组织损伤时释放的一组胞内蛋白，在宿主防御反应和组织修复中发挥重要作用，包括高迁移率族蛋白B1（HMGB1）、热休克蛋白（HSP）等。 * 抗菌肽/防御素（defensin）、透明质酸、氧自由基、某些细胞基质成分、神经介质和细胞因子等。 (二)固有免疫参与移植排斥反应 同种器官移植 ?细胞应激 ?炎性“瀑布式”反应 ?移植物组织细胞炎症、损伤和死亡 1.外科手术 ?机械性损伤 2.缺血、缺氧 * 氧依赖性酶功能异常 ?干扰氧化磷酸化 ?ATP合成（能量代谢障碍） * 膜磷脂和膜蛋白改变 ?胞膜结构和功能受损 ?细胞水肿和通透性改变 * 膜脂质过氧化 ?改变膜流动性和完整性 ?膜功能障碍 * 膜/胞浆蛋白过氧化 ?蛋白变性、交联 ?影响蛋白空间结构 ?蛋白质功能异常 * DNA过氧化 ?碱基片段缺失、基因突变 ?激活转录因子 ?炎性因子表达增加 同种器官移植(危险模式理论的理想模型) ?（手术创伤、缺血缺氧、I/R损伤） ?细胞应激 ?炎性“瀑布式”反应 ?移植物组织细胞炎症、损伤和死亡 ?同种抗原特异性应答(排斥反应） （三）HMGB1参与的移植排斥 HMGB1分子生物学特征 Structure of HMGB1 Function of Extracellular HMGB1 HMGB1 promotes graft rejection 三、慢性移植物失功的危险因素 1.免疫学因素 （1）供、受者HLA型别（-A、B和DR）不符； （2）反复发生的急性排斥反应（最主要的危险因素），其程度、次数与CR呈正相关； （3）术前群体反应性抗体（PRA）水平 移植后抗HLA或非HLA抗体水平 （4）免疫抑制剂使用不当： 用量过多 →毒性副作用 用量不足 →移植物内淋巴细胞和巨噬细胞浸润 2.非免疫学因素 （1）移植物存在功能性损害（如脂肪肝）或高龄供者 （2）脑死亡 →脑部释出大量炎症细胞因子 →促进移植器官同种组织抗原（HLA等）