第222节：动物细胞融合与单克隆抗体.pptVIP

* 2002年12月30日， 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在 “产房”—电融合仪内孕育新生命。 “太空婚礼” 这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术 植物体细胞杂交技术 动物细胞融合(杂交)技术 ？ ？ ？ 再分化 ？ 植物细胞杂交技术利用什么原理？ 用什么方法可以诱导植物细胞融合？ 一、原理： 细胞膜具有流动性 细胞的全能性 二、诱导方法：离心 振动 电激 、聚乙二醇 植物细胞杂交技术有什么用途？ 三、用途： 获得杂种植株 脱分化 ？ 1、概念： 动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 杂交细胞:融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。 2、原理： 3、过程： 不同DNA的两个细胞 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 ①诱导动物细胞融合的方法 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。 物理法： 离心、振动、电刺激等 ； 化学法： 聚乙二醇（PEG）； 生物法： 灭活的病毒；常用灭活的仙台病毒 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成杂交细胞 （细胞膜具有一定的流动性） 3、过程： 3、过程： ②融合后细胞的类型： AB杂种细胞遗传物质有什么特点？ 三种AA、AB、BB（A、B） 含两种生物的遗传物质 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 3、过程： ③动物细胞融合完成的标志： 有丝分裂 细胞核融合 ④融合后细胞的分裂方式： 4、结果： 形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 5、意义： 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 6、应用： 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 克服了远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）的不亲合障碍！ 鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡 、人—胡萝卜等 最重要的用途是制备单克隆抗体 植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较： 比较 项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合原理 细胞膜的流动性、 细胞的全能性 细胞膜的流动性 细胞融合方法 用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散后，诱导细胞融合 诱导 手段 离心、振动、电激、显微操作、聚乙二醇等诱导 与植物体细胞杂交相比，还可用灭活的病毒诱导 结果 获取杂种植株 获得杂交细胞，以生产细胞产品 用途 克服远缘杂交不亲和的障碍,扩展杂交亲本组合范围，培育新品种 制备单克隆抗体、病毒疫苗、干扰素等 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 抗体的产生： 什么是抗体？ 抗体的本质： 抗体的分布： 血清、组织液、乳汁 抗体的特点： 特异性识别抗原 浆细胞 不能识别抗原 不分裂增殖 ｛ 蛋白质(球蛋白) 　　１．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体（浆细胞产生抗体）。 　　２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　　３．每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？怎样解决这个问题？ B淋巴细胞与抗体的关系： 传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？怎样解决这个问题？ 长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，纯度低，而且抗体的特异性差，反应不够灵敏。 读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念。 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。 用单个效应B细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体。 提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 如何大量生产单克隆抗体？ 请尝试设计一个方案。 提示3：有什么方法能使一个细胞同时具备产生 抗体的能力和无限增殖能力呢？ 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体