2006年卫生部形态学室间质评.pptVIP

2006年全国室间质评-形态学图形分析 黄雅萍 油镜（10*100倍）血液细胞形态 （瑞氏-吉姆萨染色） 显微镜下寄生虫检查 尿液沉渣中有形成分 血细胞形态学 ●正常人的血液及造血器官中，各种血细胞的数量有一定的正常范围，细胞发育的不同阶段有一定形态结构特点 ●观察血细胞形态、数量、比例的变化来研究造血器官的结构和功能。造血系统疾病，引起血细胞形态学的量和质的改变 ●血细胞形态学检查：外周血和骨髓。外周血细胞改变往往反映骨髓病变的重要信息，有利于诊断。 ●疑似血液病和血液学检查异常情况，不能只依赖使用血液分析仪做血常规检查而废弃镜下血涂片细胞形态学检查的错误倾向。 细胞形态学检查方法 1．光镜细胞形态学；细胞形态学的基本内容和常用的检查方法 2．细胞化学染色：细胞和化学相结合的形态学方法，主要用于白血病分型鉴别诊断 3．相差镜检查：观察活细胞的内部结构及活动，细胞生长成熟衰亡过程及对各种刺激的反应 4．荧光显微镜检查用荧光染色血细胞，常用于DNA、RNA的检查。近年逐渐被流式细胞仪替代 5．电镜（透射/扫描）观察细胞超微结构，在形态学上是对光镜的一个重要扩展和补充 6．骨髓组织病理学检查是对骨髓涂片检查的一个重要补充，相互补遗提高诊断水平。 骨髓及外周血细胞形态学及分类 白细胞分类的自动化只能为患者普查与筛选。遇有问题应用显微镜观察 显微镜档次偏低，分辨率低，维修和正确使用欠缺 血细胞涂片特性： 1．涂片不易均匀：WBC、RBC、PLT的形态大小、比重、生物活性及血浆成分不同和制片技术、细胞分布不均匀性差异大 2．细胞分布与分类的非随机性： 细胞分类标准与观念不一； 采样和计数100~200个白细胞的局限性； 细胞分布的生理变动； 3. 与疾病的相关性； 4. 形态学质控： 开展室间质控促进形态学的质量稳定。1983年以来，澳大利亚皇家病理学质控中心和英国皇家进修学院WHO质控中心及最近美国洛杉矶质控中心，国内的全国及各省地市也普遍开展，由质控标本涂片发展图片指定细胞识别； 必须健全诊断报告审核制度、专业进修、讲习班、读片研讨会等学术交流，是提高形态学诊断质量的保障。 血细胞形态学采样、制片要求 玻片要求：要严格清洁，接近中性；推片要两端边缘整齐、平滑 采血量适中，如绿豆粒大小 具有一定推片技术，推片倾斜30°～45 ° ，推成血膜长度25～35mm，宽度18～20mm，血膜四周留有空隙区，血膜终尾离玻片终端至少10mm，血膜具有头、体、尾不同厚薄区域，尾端形如弧状，涂片时，还应考虑患者的血液状态，如贫血程度、血液粘稠度、WBC或有核细胞多少等因素，调整推片技巧。 血细胞染色法 细胞染色机理：将细胞经染色剂的物理及化学作用，使其清楚显示细胞各个组成部分，有利辨识细胞形态。一般染色方法由两种染色剂（酸性、碱性）组成 血细胞的染色多采用瑞氏染色和姬姆萨染色。混合染色法，比单用一种染色法更佳。 一些快速和改良染色方法及染色液商品化，对血细胞形态染色不一定适用。 瑞氏（Wright’s staim；美蓝－伊红Ｙ）染色： 由碱性染料美蓝（Methvlem blue）和酸性染料黄色伊红（Eostm Y）合称伊红美蓝染料。 姬姆萨（Giemsa’s stain；天青-伊红）染色：伊红(AzurII Eqsin)和天青（蓝）2号合成。 混合染色优点：瑞氏染料对细胞核结构和色泽清晰艳丽，但对胞浆着色偏酸，对浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差。姬姆萨染色能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别对嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒着色清晰， 而对胞核着色偏深，核结构显示较差。故采用以瑞氏染液为主，姬姆萨染液为辅的混合染色。 外周血涂片检查步骤 肉眼观察：涂片面膜大小、厚薄是否适中，染色好坏 低倍镜观察全貌：了解染色及白细胞数、大致分布、分类大致比例，特别要注意由于涂片过力，把WBC及成熟粒细胞大多推于片尾部位，造成分类比值误差。片尾有无异常细胞？选择具有代表性的细胞镜检区域。根据各细胞分布要适当调整分类部位 油镜观察：细胞数量、形态及异常物质出现 （1）进行WBC分类比值，观察细胞形态、有无巨大或异常细胞。特别注意片尾端有无巨大或出现不成熟或异常细胞（如中晚幼粒、中晚幼红细胞、异常淋巴细胞、吞噬细胞、肿瘤细胞等）； （2）红细胞形态（群体、个体）、排列（重叠、缗钱状）； （3）血小板数量、形态及聚集性； （4）寄生虫 当在分类计数过程中发现较多有核红细胞，计出血片中有核红所占%并报告（有核红细胞 个/100个WBC），即WBC分类计100个过程中遇到多少有核红细胞，以校正外周血中WBC计数值。 外周血血小板形态学诊断 观察血小板数量、形态及聚集