多种荧光--多通道实时荧光定量PCR检测HPVDNA结果分析.pdf

第 34卷第5期 同 济 大学 学报 (医学 版 ) Vo1．34NO．5 2013年 10月 JOURNALOFTONG~UNIVERSITY(MEDICALSCIENCE) Oct．．2013 doi：10．3969／j．issnl008—0392．2013．05．007 · 基础 研 究 · 多通道实时荧光定量 PCR检测 HPVDNA结果分析 赵旭鸿，李 智，赵 迪 (上海市杨浦区中心医院检验科，上海 200090) 【摘要】目的 探讨多通道实时荧光定量PCR检测HPVDNA的效果，并应用于日常检测工作。方法 对临床 1100例宫颈分泌物标本采用多通道 实时荧光定量 PCR仪进行 8种高危 HPVDNA分型及定量检测。8种高危 HPV型别为主要高危型HPV16、18、45、31和次要高危型HPV33、52、58、67。结果 在 1100例标本中排除了14例 p球蛋 白为阴性的标本 ，剩余 1086例标本总体 的内标平均值为 3．71×10 IU／ml。随机重复性试验和对每个型别 的各浓度标本进行的重复性试验每次扩增均为阳性，型别符合率为 100％。共检测 出阳性标本 287例，HPV16、 HPV18／45、HPV31、次要高危型和合并感染各有46、17、14、146和64例，分别 占总阳性标本的16％、6％、5％、5l％ 和22％。所有标本绝对定量值的分布近似于正态分布。结论 多通道荧光定量PCR检测HPvDNA灵敏度高、复 性好，可用于临床HPV感染的筛查与宫颈病变程度预测 以及患者术后疗效观察。 【关键词】人乳头状瘤病毒；多通道实时荧光定量聚合酶链反应；病毒载量 【中图分类号】R711．32 【文献标志码】A 【文章编号】1008—0392(2013)05—0031—05 Detection ofHPV DNA byusingmulti-channelfluorescence realtimequantitativePCR assay ZHA0 Xu—hong，LIZhi，ZHA0 Di (Dept．ofClinicalLaboratory，CentralHospitalofYangpuDistrict，Shanghai200090，China) 【Abstract】Objective Toevaluatethedetectionofhumanpapillomavirus(HPV)DNAbyusing multi—channelfluorescencerealtimequantitativePCR assay．M ethods Eightgenotypesofhigh risk HPV (HPV16，18，45，31andHPV33，52，58，67)DNAwerequantitativelydetectedbyusing multi—channelfluorescenceReal—TimePCR in 1100 samplesofcervicalsecretions．Results In1100 samples，14wereexcludedbecauseofnegative3[一globin；whilein1086includedsamples，B—globin wasassayed simultaneously for absolute quantization of genomic DNA with an average levelof 3．71E +6 IU／m1．Allpositiveresultswereobtainedboth inrandom repeatability testandrepeatability testofreachtypeswim v ousconc