HPLC法测定红穿破石中大黄素的含量.docVIP

[标签:标题1] 【摘要】 目的 建立红穿破石中大黄素含量的高效液相色谱测定方法。方法 选用Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),以甲醇-0.1%磷酸溶液(75∶25)为流动相,检测波长为285 nm。结果 大黄素在0.0063～0.063 μg范围内呈良好的线性关系(r＝0.999 9),平均回收率为102.0%,RSD＝1.58%(n＝6)。结论 本法简便,准确,可用于红穿破石中大黄素的含量测定。 【关键词】 红穿破石；大黄素；高效液相色谱法 Abstract：Objective To establish a HPLC method for determining emodin in Radix et Caulis Ventilaginis leiocarpae. Methods Stationary phase was Agilent Eclipse XDB-C18 (4.6 mm×150 mm, 5 μm), mobile phase was methanol-0.1%phosphoric (75∶25), detection wavelength was 285 nm, flow rate was 1.0 mL/min and column temperature was 30 ℃. Results There was good linearity in the range of 0.006 3～0.063 μg for emodin (r＝0.999 9). The average recovery of emodin was 102.0% with RSD＝1.58%. Conclusion This method is rapid and accurate. It can be applied to control the quality of Radix et Caulis Ventilaginis leiocarpae. 　　Key words：Radix et Caulis Ventilaginis leiocarpae；emodin；HPLC 红穿破石为鼠李科植物翼核果Ventilago leiocarpa Benth.的干燥根和老茎,主产于广西等地[1],具有清热利湿、利尿通淋的作用,特别是对消石具有特殊功效,民间常用于尿路感染、急慢性肾炎、肾结石的治疗,现已有多个制药厂家把它作为治疗结石症的重要组方。王氏等[2]报道,从广西产红穿破石根和茎中分离到大黄素、大黄素甲醚、1,2,4,8-四羟基-3-甲基蒽醌、翼核果醌-Ⅰ、翼核果素,其中大黄素为该植物的主要化学成分。有关红穿破石的主成分含量测定尚未见报道。本试验采用HPLC法对红穿破石中大黄素进行含量测定,为药材生产和质量标准提供科学依据。 　　1 仪器与试药 　　美国Agilent1100系列高效液相色谱仪(包括四元泵,自动进样器,脱气机,紫外可见检测器,柱温箱和Agilent1100化学工作站),BUG40型超声波清洗器(上海必能信有限公司)。 　　大黄素对照品(批号110756-200110,含量测定用)由中国药品生物制品检定所提供,纯度在98%以上；红穿破/bsjyxlw/bsjyxlw.html石由广西玉林制药有限责任公司提供,来源于广西各地,经广西玉林制药有限责任公司中药鉴定室专家鉴定。水为重蒸馏水,甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm)；流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(75∶25)；流速：1.0 mL/min；检测波长：285 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μL。理论板数按大黄素计算应不低于3 000。在此色谱条件下,红穿破石样品能够达到基线分离(见图1)。 　　2.2 对照品溶液的制备 精密称取大黄素对照品适量,加甲醇制成每1 mL含大黄素6.3 μg的溶液,作为对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 取红穿破石粉末适量,取0.4 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50 mL,称定重量,超声30 min,放冷,再称定重量,用/xiangmuguanli.html甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,滤液用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液,作为供试品溶液。 　　2.4 线性关系的考察 分别精密吸取大黄素对照品溶液(6.3 μg/mL)1、2、4、6、8、10 mL,置于10 mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,各进样10 μL,连续进样2次,测定峰面积。以对照品进样量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得