常用微生物染色方法..ppt

常用微生物染色方法 泰兴市人民医院检验科微生物室 刘鸿丽 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 1、革兰染色2、抗酸染色3、墨汁染色 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 革兰氏染色 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 革兰氏染色原理 一 通透性学说 二 等电点学说 三 化学学说 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. G- / G+ 细菌细胞壁比较示意图 肽聚糖层 磷脂层 LPS 磷壁酸 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 革兰氏阳性菌细胞壁结构比较致密，肽聚糖层很厚，脂类含量较少，酒精不易渗入，而且95％酒精可使细胞壁脱水，间隙变小，通透性降低，阻碍结晶紫-碘复合物渗出； 革兰氏阴性菌细胞壁结构比较疏松，肽聚糖层很薄，外膜、脂蛋白、脂多糖均含有大量脂质，易被酒精溶解，致使细胞壁通透性增高，细胞内的结晶紫-碘复合物被酒精溶解洗出而脱色。 原理 一 通透性学说 二 等电点学说 三 化学学说 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 革兰氏阳性菌等电点（pH 2-3）比革兰氏阴性菌等电点（pH 4-5）低，加之媒染剂碘为弱氧化剂能降低革兰氏阳性菌的等电点，因此在同样的pH的染色环境中，阳性菌所带负电荷比阴性菌多，与带正电荷的结晶紫染料能牢固结合，不易被酒精脱色。 原理 一 通透性学说 二 等电点学说 三 化学学说 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 革兰氏阳性菌含有大量核糖核酸镁盐，其可与结晶紫-碘结合成大分子复合物，因而不易被95％酒精脱色；而阴性菌中此物质含量较少，因而吸附染料量很少，分子量也较小，故易被酒精脱色。 原理 一 通透性学说 二 等电点学说 三 化学学说 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 细菌涂片的制备 涂片：取一张洁净载玻片，用已灭菌的接种环取一环生理盐水于玻片中央，再将接种环灭菌，取菌与生理盐水磨匀，涂布成1cm×1cm大小区域的均匀薄膜，使盐水磨成灰白色为宜，接种环灭菌后放回试管架。 干燥：涂片最好在室温下自然干燥或将标本片涂抹面向上，置酒精灯火焰上半尺高处慢慢烘干。 固定：常用火焰加热法，手执载玻片一端，标本面向上，迅速来回通过火焰三次。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 注意点 ⒈取菌量不可太多，涂片应均匀，否则影响染色结果 ⒉干燥时切忌高热，以免细菌变形 ⒊固定时温度不可过高时间不可长，以防涂抹面 烧焦及玻片烧裂 固定的目的 杀死细菌，使菌体蛋白凝固，染料易于着色 改变细菌通透性，以利于染料进入细胞内 使菌体与玻片粘附牢固，在染色时不致被染 料和水冲掉 E