采用基因微阵列技术对常见呼吸道病毒进行检测的初步研究.pdfVIP

第 2 1 卷 　第 6 期 病 　　毒 　　学 　　报 Vol . 2 1 　　No . 6 　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　 2 0 0 5 年 11 月 CHIN ESE J OU RNAL OF V IROL O GY November 　2 0 0 5 采用基因微阵列技术对常见呼吸道病毒进行检测的初步研究 1 2 1 1 1 1 孙梅生 ,王征 ,周蕊 ,马学军 ,舒跃龙 ,侯云德 ( 1 中国疾病预防控制中心 病毒病预防控制所 ,北京 100052 ; 2 病毒生物技术国家工程研究中心 北京金迪克生物技术研究所 ,北京 100 176) 摘要 :建立一种高通量的基因微阵列检测技术 ,对常见呼吸道病毒感染进行监控 。根据公开发表的 8 个病毒科 38 种常见呼吸道病毒的序列 ,计算其保守区域 ,设计病毒的特异性检测探针 ,制备呼吸道病毒检测基因微阵列 。利用 随机引物 PCR 方法标记样品中的病毒靶序列 ,标记产物与基因微阵列上的探针杂交 ,清洗 、扫描后进行结果分析 。 采用流感病毒 、麻疹病毒 、腮腺炎病毒和风疹病毒作为报告病毒 ,并对 80 例上呼吸道感染患者的咽拭子标本进行 验证测试 。初步结果表明 ,该呼吸道病毒微阵列基因芯片检测是可行的 ,在利用基因微阵列技术对病毒监控方面 进行了有益的尝试 ,得到了有经验的信息 。 关键词 :呼吸道病毒 ;基因微阵列 ;病毒监控 ( ) 中图分类号 :R3731 　　文献标识码 :A 　　文章编号 :1000 - 872 1 2005 06 - 04 16 - 06 　　呼吸道病毒是指一组能引起急性呼吸道感染的 行检测和监控 ,可以实现对多种病毒同时平行监控 , 病毒 ,并不是病毒分类学上的名称 。常见的呼吸道 具有特异和快速筛选的特点 。 病毒有正粘病毒科的流感病毒 ,副粘病毒科的副流 感病毒 、麻疹病毒 、腮腺炎病毒 、呼吸道合胞病毒 , 以 材料与方法 及腺病毒 、冠状病毒 、风疹病毒 、呼肠病毒等 。据统 计 ,在急性呼吸道感染中 ,90 % 以上是由病毒引起 1 　病毒及病毒培养 　流行性感冒病毒 A/ PR/ 8/ 34 ( H1N 1) ( ) 的 ,大多数急性上呼吸道病毒感染具有感染力强 、传 株 本室保存 ,接种 9 日龄鸡胚尿囊腔 0 2ml/ 枚 , 33 ℃培养 48h 后冷冻过夜 ,收获尿囊液 。将收获的病毒液接种 MDCK 播快 、潜伏期短 、发病急、以呼吸道局部免疫为主 ,感 ( ) 细胞 ,做空斑形成单位 PFU 试验标化感染性病毒颗粒数 。 染后免疫力不持久等特点 。呼吸道病毒病是人类传 史克必成有限公司的麻疹 、腮腺炎 、风疹联合减毒疫苗 由 染病中发病率最高 、最为常见的疾病 ,在