食品学院_6130111048_王梦颖 - 最终提交版本.docxVIP

分类号密级全日制专业学位硕士学位论文题目：乳杆菌体外生理特性与其肠道定植的相关性研究英文并列题目：Correlation betweenin vitro PhysiologicalCharacteristics and Gastrointestinal Colonization of Lactobacillus研究生：王梦颖专业名称：食品工程研究方向：食品加工技术导师①姓名：职称：导师②姓名：职称：学位授予日期：答辩委员会主席：陈洁教授江 南 大 学地址：无锡市蠡湖大道1800号二〇一六年六月摘要乳杆菌（Lactobacillus）是人体肠道菌群的重要组成之一，其作为肠道微生物屏障，能抵抗致病菌入侵、预防肠道疾病，同时保持肠道系统的稳态，但这些益生功效持续发挥的前提是菌株能够在肠道中定植。目前对乳酸菌的肠道定植能力评价的研究较多，但对影响菌株肠道定植能力因素的分析少有报道。本研究对16株乳杆菌菌株的肠道定植能力及体外的生理特性分别进行了测定，并对二者进行了相关性分析，以期找到与菌株定植能力相关的生物学因素。本课题首先从东北酸菜、山西老陈醋酒醅和醋醅、酸奶这三种传统发酵食品中分离出8种乳酸菌，共计49株。从上述菌株及江南大学食品微生物保藏中心保藏菌株中选择6种应用较广泛的乳杆菌，共计16株。以16株乳杆菌为研究对象，对其生长和产酸特性、对肠道上皮细胞的粘附情况、对人工胃肠液耐受能力以及对功能性低聚糖的体外利用等生物学特性进行了测定，整体而言植物乳杆菌CCFM10、H7及干酪乳杆菌C6具有较好的生物学指标，而3株瑞士乳杆菌则略差。采用动物实验测定16株乳杆菌在小鼠肠道的定植能力，结果显示植物乳杆菌H7和干酪乳杆菌C6定植能力最强，能够在小鼠肠道至少定植14天，其次是植物乳杆菌CCFM10、鼠李糖乳杆菌CCFM648以及干酪乳杆菌CCFM9，这三株菌定植能力中等，可在小鼠肠道分别定植12天、10天、10天，而干酪乳杆菌J1、植物乳杆菌CCFM634、鼠李糖乳杆菌Y2和保加利亚乳杆菌CCFM665的定植能力相对较弱，剩余的7株菌在小鼠肠道几乎不定植。乳杆菌菌株的喂食对正常小鼠的体重、血清生理生化指标、结肠和盲肠重量、盲肠内容物的短链脂肪酸含量等指标均未造成显著的影响。最后，对16株乳杆菌的肠道定植能力及上述生物学特性进行主成分分析，结果表明上述特性在菌株之间存在较大差异，在种间可能不存在联系。采用皮尔森相关性分析法分析菌株的肠道定植能力与上述六种生物学特性指标之间的相关性。结果表明，菌株肠道定植能力与其细胞粘附指数、对人工胃液和人工肠液耐受率、对低聚果糖和低聚木糖的体外利用能力之间均不存在相关性（r=0.382，p=0.144；r=-0.266，p=0.320；r=0.483，p=0.058；r=0.051，p=0.851；r=0.399，p=0.126），与其生长能力及菌株发酵液pH之间存在显著的相关性（r=0.559，p=0.024；r=-0.629，p=0.009），这说明菌株的产酸能力对其在肠道的定植而言至关重要，产酸能力强的菌株具有更好的肠道定植能力的可能性。综合上述研究结果，菌株的产酸能力是与肠道定植最具相关性的体外生理特性，次相关的是菌株的生长能力，证实了菌株肠道定植能力体外评价的可能性，本研究为良好肠道定植能力乳酸菌的体外筛选打下了初步理论基础，具有一定的实用价值。关键词：乳杆菌；肠道定植；生理特性；相关性分析AbstractLactobacillus is one of the main components of human intestinal flora, which could act as a microbial barrier of human gut protectingit from pathogen invasion, preventing intestinal diseases and maintaining the homeostasis of the intestinal system. However, only if thestrain colonize could they exert their probiotic functions in the gut continuously. Evaluation of intestinal colonization abilities has been analyzed for several Lactobacillus strains, but the researchabout determining factors influencingthe intestinal colonization of strainswas rarely r