第3章 植物细胞工程的基本理论.ppt

第一节 植物细胞的全能性 第二节 植物细胞的分化 第三节 器官发生与体细胞胚胎发生 第四节 人工种子 植物细胞全能性表达的条件 （1）离体 （2）植物生长调节物质的是必备的关键物质 （3）供给植物生长所必须的营养物质和环境条件 脱分化（dedifferentiation） ：培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程。 愈伤组织（callus）：脱分化后的细胞，经过分裂形成无特定结构和功能的松散的细胞团，具有再分化的能力。 再分化（Redifferentiation）： 脱分化后的分生细胞在特定的条件下，重新回复细胞分化能力，形成各种不同类型的细胞，并经历器官发生或胚胎发生，进一步发育成完整植物体的过程。 不同类型细胞实现全能性的能力 1、诱导期（Induction） 2、分裂期（Cell division） 3、分化期（Differentiation） 1、诱导期（Induction） 细胞分裂的准备期，即脱分化。 细胞脱分化（dedifferentiation） ： 培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程。 脱分化期细胞结构的变化： 细胞内合成代谢活跃，细胞质增加显著变浓；大液泡消失；细胞核体积增加并逐渐移位至细胞中央；细胞器增加；细胞内核糖体增加并形成大量多聚核糖体，RNA迅速合成和积累。 两个重要特征： 液泡蛋白体的出现、质体转变为原质体。 这一时期细胞形态大小不变。 2、分裂期（Cell division） 3、分化期（Differentiation） 即形成期，是指外植体的细胞经过诱导、分裂形成了无序结构的愈伤组织的时期。 但在细胞分裂末期，细胞内开始发生一系列的形态和生理变化，导致细胞在形态和生理功能上的分化，出现形态和功能各异的细胞，出现组织分化。 分化期的主要特征：出现组织分化。 （1）细胞分裂部位和方向发生改变； （2）拟分生组织和维管组织结节的形成； （3）细胞的体积不再减小，出现各种类型的细胞，分生细胞、薄壁细胞、厚壁细胞和管状分子等，出现一定的形态特征； （4）各种酶的活性加强，淀粉的累积，RNA和组蛋白合成速度加快。 细胞分化（differentiation）：是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程 。 细胞分化的结果，导致植物体中形成多种类型的细胞。分化是一种持久性的变化，发生在生物体的整个生命过程中。 细胞再分化的实质就是细胞分化。 （3）器官分化 在培养条件下，植物细胞经过器官分化形成完整个体有两种途径： 一是器官发生（organogenesis） 二是体细胞胚胎发生（somatic embryogenesis） 1、愈伤组织的类型 外观上：旺盛生长的愈伤组织其质地有显著差异，可分为松脆型及坚硬型两类，两者且可以互相转化。 再生能力上：胚性愈伤、非胚性愈伤。 来源于不同植物或同一植物的不同部位的愈伤在颜色、结构和生长习性上都可能存在差异。即便是在同一块愈伤上也会由于各种因素的作用存在颜色和结构上的差异。 4、长期培养物形态发生潜力的丧失的原因 生理学说：培养组织或细胞中的内源激素失衡。 遗传学说：遗传物质在培养继代过程中由于变异等原因而发生了改变或是突变。 竞争学说：细胞对于生长素抑制全能性表达的作用变得比较敏感；反复的继代培养中，非胚性细胞的群体将会逐步增加，而胚性成分则逐渐减少。 四、影响植物细胞脱分化和再分化的因素 1、培养基 2、外植体 3、激素的作用 4、培养条件的影响 创伤的作用： 使植物细胞形成机械隔离和生理隔离，由切割而造成的机械和生理隔离对细胞脱分化、再分化是十分重要的，也可以说是植物细胞全能性表现的重要措施。 植物激素的作用： 植物个体的发育是受植物体内的全部遗传信息中部分信息的“开”和 “关”所控制的。而控制这一过程的“效应子”就是植物激素。 植物激素中的生长素和细胞分裂素是启动细胞脱分化、分裂和再分化的关键性激素。 所以在离体培养条件下，由于切割创伤和外源激素的作用下，使部分遗传信息开放。从而改变了植物的代谢路线，使之朝着胚性细胞的方向发育。 第三节 器官发生与体细胞胚胎发生 一、器官发生（organogenesis） 1、概念 器官发生：是指培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定芽（adventitious buds）、不定根（adventitious roots）等器官的过程。 2、器官发生的方式（P49） 先芽后根 先根后芽 根芽同步 3、影响器官分化的因素 二、体细胞胚胎发生 1、概念 体细胞胚胎发生（somatic embryogenesis